【題目】下圖表示某質(zhì)粒載體,圖2表示植物甲的抗旱基因,該基因兩端分別包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內(nèi)的多種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答下列問題:

1)目前獲取目的基因的常用方法有:①從_______________中獲取目的基因;②利用__________擴增目的基因。

2)若目的基因和質(zhì)粒載體分別用EcoRⅠ酶切,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶處理后,兩兩連接對的產(chǎn)物有_________種類型。將上述連接產(chǎn)物導(dǎo)入無任何抗藥性的宿主細胞中,再將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能正常生長的宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是__________________________________________________ 。實驗中,為了防止目的基因和質(zhì)粒載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,酶切時因選用的酶是_________________。

3)為大量培養(yǎng)抗旱新品種植物,將基因表達載體構(gòu)建完成后一般不直接導(dǎo)入農(nóng)桿菌,而是先將其轉(zhuǎn)入處于________的大腸桿菌中,導(dǎo)入大腸桿菌的目的是_______________________

【答案】基因文庫 PCR技術(shù) 3 載體--載體連接物(或質(zhì)粒一質(zhì)粒連接物) EcoR IBamH I 感受態(tài) 獲取大量重組質(zhì)粒

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:

1)目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

1)目前獲取目的基因的常用方法有:從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增。

2)將含有抗旱基因的DNA與該質(zhì)粒表達載體分別用EcoRⅠ酶切,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶處理后,兩兩連接的產(chǎn)物有3種,即含有耐旱基因的DNA與含有耐旱基因的DNA連接、質(zhì)粒與質(zhì)粒連接、含有耐旱基因的DNA與質(zhì)粒連接。由圖可知,構(gòu)建基因表達載體時,四環(huán)素抗性基因會被破壞,因此將上述連接產(chǎn)物導(dǎo)入無任何抗藥性的宿主細胞后,將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能正常生長的宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是載體-載體連接物(或質(zhì)粒-質(zhì)粒連接物)。酶切時應(yīng)選用限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ,形成不同的黏性末端,這樣可以防止目的基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接。

3)為大量培養(yǎng)抗旱新品種植物,將基因表達載體構(gòu)建完成后一般不直接導(dǎo)入農(nóng)桿菌,而是先將其轉(zhuǎn)入處于感受態(tài)的大腸桿菌中,目的是為了獲取大量重組質(zhì)粒。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】圖為白化病遺傳系譜圖(有關(guān)遺傳因子用A、a表示),請據(jù)圖回答。

1)該遺傳病是由__________性遺傳因子控制的疾病。

2)Ⅱ2的遺傳因子組成為________。

3)Ⅲ2是雜合子的概率為__________。

4)若Ⅲ2和Ⅲ3婚配,后代患白化病的可能性為__________,預(yù)計他們生一膚色正常女孩的可能性為____________。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖是反射弧局部結(jié)構(gòu)示意圖,刺激c點,檢測各位點電位變化.下列說法中錯誤的是()

A. 若檢測到b、d點有電位變化,說明興奮在同一神經(jīng)元上是雙向傳導(dǎo)的

B. 興奮由c傳導(dǎo)到e時,發(fā)生電信號→化學(xué)信號→電信號的轉(zhuǎn)換

C. a處檢測不到電位變化,是由于興奮在神經(jīng)元之間是單向傳遞的

D. 電表①偏轉(zhuǎn)一次,電表②偏轉(zhuǎn)兩次

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖是一個白化病家族的遺傳系譜圖。若Ⅲ123婚配生下的孩子,請寫出Ⅰ1、Ⅰ3的基因型以及Ⅲ1 為白化病患者的幾率(

A.AA、Aa 1/16B.AaAa 1/9

C.Aa、AA 1/4D.Aa、Aa 1/64

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖為高等動物的細胞分裂示意圖。正確的是

A.圖甲一定為次級精母細胞

B.圖丙中的 M、m 為一對同源染色體

C.圖丙為次級卵母細胞或極體

D.圖乙一定為初級卵母細胞

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】甲、乙、丙圖是通過顯微鏡觀察的示意圖,相關(guān)敘述正確的是(

A. 上述圖像均是在高倍顯微鏡下觀察的

B. 若乙圖視野暗,可以通過調(diào)大光圈和凹面鏡進行調(diào)節(jié),丙圖可以調(diào)節(jié)細準焦螺旋使視野清晰

C. 乙圖和丙圖細胞的活性不同,材料均取自洋蔥鱗片葉外表皮

D. 觀察顏色深的材料時,視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗,反之則應(yīng)適當(dāng)調(diào)亮

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】某些溶劑可以破壞多肽鏈結(jié)合時的非共價相互作用。用某溶劑處理蛋白質(zhì),可以使蛋白質(zhì)變性,成為失去自然構(gòu)象的松散肽鏈。當(dāng)去掉該溶劑時,蛋白質(zhì)又可以自發(fā)地重新復(fù)性成為原來的構(gòu)象,實驗如圖所示,下列說法錯誤的是( )

A. 變性的蛋白質(zhì)能夠恢復(fù)原來的構(gòu)象

B. 實驗中所用蛋白質(zhì)的構(gòu)象只由它的氨基酸序列決定

C. 無法用雙縮脲試劑來檢測蛋白質(zhì)是否變性

D. 對變性后的蛋白質(zhì)進行氨基酸序列測定,無法得到其準確序列

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖甲、乙、丙分別為真核細胞中三種結(jié)構(gòu)的示意圖,圖丁表示傘藻的核移植實驗。請回答下列問題:

1)原核生物中沒有甲,但有與甲功能相似的_____________。圖丁所示實驗可說明____________

2)在真核細胞中,構(gòu)成生物膜系統(tǒng)的是_____________(填名稱)等結(jié)構(gòu)。許多重要的化學(xué)反應(yīng)在生物膜上進行,乙通過_____________(填字母)擴大了膜面積,從而為化學(xué)反應(yīng)需要的_____________提供更多的附著場所。

3)動植物細胞在結(jié)構(gòu)上有很多不同點,區(qū)分動植物細胞最可靠的依據(jù)是有無___________結(jié)構(gòu),且其成分主要是_____________。

4)研究表明,硒有穩(wěn)定線粒體膜的作用,可影響以下_____________(填序號)過程。

①乙醇分子進入細胞 Ca2+進入細胞 ③葡萄糖進入哺乳動物成熟的紅細胞

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列關(guān)于乳酸菌、酵母菌和青霉菌這三種微生物的共性的敘述,錯誤的是

A. 三種微生物的活細胞內(nèi)均時刻發(fā)生著ATP和ADP的相互轉(zhuǎn)化

B. 在三種微生物的細胞中mRNA都能通過核孔進入細胞質(zhì)中發(fā)揮作用

C. 都能在核糖體上發(fā)生堿基互補配對并合成多肽鏈

D. 三種微生物的遺傳物質(zhì)都是DNA,并且都能發(fā)生基因突變

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