（1）與PCR相比，過程①需要的特有的酶是______，應(yīng)從人體______（器官）的組織細(xì)胞中獲得模板RNA。

（2）DNA分子被SacⅠ切割后，形成的黏性末端是______。過程②選用SacⅠ、SacⅡ分別切割hNaDC3基因和質(zhì)粒載體，可實現(xiàn)目的基因定向插入并正常表達(dá)的原因是______。

（3）過程③可獲得多種重組DNA，可依據(jù)不同DNA分子的大小，運用______（技術(shù)）分離、篩選重組表達(dá)載體。

（4）顯微觀察導(dǎo)入“綠色熒光蛋白-hNaDC3融合基因”的豬腎小管上皮細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)：轉(zhuǎn)染后第1天綠色熒光混合分布于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜，核中未見綠色熒光；到第5天綠色熒光清晰聚集于細(xì)胞膜，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中未見綠色熒光。根據(jù)這一觀察結(jié)果還不能得出“hNaDC3是在細(xì)胞質(zhì)中生成后，在細(xì)胞膜上發(fā)揮作用”的結(jié)論，需要設(shè)置對照實驗以排除綠色熒光蛋白本身的定位，對照實驗的設(shè)計思路是______。

（5）研究人員以較高濃度的葡萄糖溶液培養(yǎng)導(dǎo)入融合基因的豬腎小管上皮細(xì)胞，一段時間后發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染細(xì)胞的細(xì)胞膜上綠色熒光明顯增強。這一實驗結(jié)果可以說明______。

（l）乙細(xì)胞的名稱是____，該細(xì)胞中含有____個染色體組。

（2）對性腺組織細(xì)胞進行熒光標(biāo)記，R、r都被標(biāo)記為黃色，D、d都被標(biāo)記為綠色。在熒光顯微鏡下觀察處于四分體時期的一個正常細(xì)胞，則該細(xì)胞中熒光點的數(shù)目及位置情況是____。

（3）若與乙細(xì)胞一起形成的另一個細(xì)胞在分裂后期有一對姐妹染色單體移向同一極，則最終產(chǎn)生的四個子細(xì)胞中，染色體數(shù)目異常的細(xì)胞所占的比例是____。

A.該實驗中的溫度和光照強度應(yīng)適宜并且保持一致

B.吸收的氮可用于合成NADPH和葉綠素等含氮物質(zhì)

C.適當(dāng)增大CO2濃度和施加氮肥都有利于小麥增產(chǎn)

D.葉綠體中CO2的固定量就是測得葉片的CO2吸收量

（1）利用PCR技術(shù)擴增的目的基因，可以___________，也可從基因文庫中獲得。擴增的過程是：目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，___________與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合，然后在___________作用下進行延伸，如此重復(fù)循環(huán)多次。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)的實驗中要注意將外植體進行___________（“消毒”或“滅菌”）。愈傷組織形成后，要將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到___________培養(yǎng)基上，一段時間后誘導(dǎo)出試管苗再移栽大田，培養(yǎng)成正常植株。

（3）對于小鼠、兔和家畜可用___________處理使其排出更多的卵子，這種獲得卵母細(xì)胞的方法叫___________。

（4）“三北”防護林在最初階段單一種植了大片的樟子松，導(dǎo)致偶然滋生的松毛蟲肆虐一時，原因是沒有遵循生態(tài)工程的___________原理。

（1）若兩個雜交組合的F1都只有一種性狀，則①和②分別為____________。

（2）現(xiàn)有純合的褐色卷曲葉與黃色正常葉擬南芥植株，請設(shè)計實驗來確定基因A、a和B、b是否遵循自由組合定律（不考慮交叉互換）。

①設(shè)計思路：____________。

②預(yù)計結(jié)果與結(jié)論：

若____________，則基因A、a和B、b不遵循自由組合定律；

若_____________，則基因A、a和B、b遵循自由組合定律。

（3）有證據(jù)表明，DNA甲基化抑制劑5—azaC對植物的生長和發(fā)育有一定作用。研究人員在培養(yǎng)液中添加5—azaC會使擬南芥的種皮顏色發(fā)生改變，并設(shè)計了實驗3：

實驗組：黃色（添加5—azaC）F1灰色（不添加5—azaC）F2灰色

對照組：黃色（不添加5—azaC）F1黃色（不添加5—azaC）F2黃色

以上實驗得出的實驗結(jié)論是：__________。

回答下列問題：

（1）如上圖所示，供核的牛胎兒成纖維細(xì)胞通常選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，其原因是 _______________________________________________________________。

（2）SRY-PCR法性別鑒定的基本程序是：提取牛胎兒成纖維細(xì)胞的DNA，經(jīng)PCR反應(yīng)體系擴增SRY基因（Y染色體上特有的性別決定基因）片段，然后對擴增產(chǎn)物進行檢測。

要大量獲得SRY基因，PCR擴增時需要加入兩種引物：__________________（選填“引物I”、“引物II”、“引物III”、“引物IV”），原因是DNA聚合酶只能從核苷酸鏈的______________（2分，選填“5’端”或“3’端”）開始延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保______________。除引物外，PCR反應(yīng)體系中還包含緩沖液、模板DNA、____________和 ____________等成分。通過SRY-PCR法進行性別鑒定，可獲得更多的轉(zhuǎn)HSA基因________牛，以便其通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人血清白蛋白。

（3）在胚胎移植操作中，應(yīng)對供體和受體母牛進行_____________處理，目的是使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)，使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致。由此可見，胚胎移植的實質(zhì)是_____________________________________________。

（1）要獲取iPS細(xì)胞，首先要進行黑鼠體細(xì)胞體外培養(yǎng)。為了方便實驗開展，可以對黑鼠組織用胰蛋白酶處理，其目的是消化______，以獲得單個細(xì)胞的懸浮液。然后通過______得到純系的細(xì)胞群。

（2）對從灰鼠的______部位獲取的2-細(xì)胞胚胎，進行體外培養(yǎng)至囊胚后，將其制成重組囊胚。重組囊胚移植到白鼠體內(nèi)后其______部分會發(fā)育形成胚胎的附屬結(jié)構(gòu)或胚外結(jié)構(gòu)，而______分化出成體動物的所有組織和器官。

（3）制備iPS細(xì)胞的方法是把0ct4等轉(zhuǎn)錄因子在基因?qū)�入小鼠成纖維細(xì)胞，誘導(dǎo)其發(fā)生轉(zhuǎn)化，從而產(chǎn)生iPS細(xì)胞。在基因?qū)�入過程中，除了質(zhì)粒外，還可以選用______為運載體。若將某目的基因?qū)�入的受體細(xì)胞為大腸桿菌時______（能/不能）選用T2噬菌體為運載體。

限制酶識別序列和酶切位點表

(1) ①過程催化形成磷酸二酯鍵的酶有____________________，合成的人生長激素基因中________(選填“有”或“無”)與終止密碼子相應(yīng)的堿基序列。

(2) 引物1由5′→3′的堿基序列為________________________，引物2應(yīng)含有限制酶________的識別序列；從圖1的過程②開始進行PCR擴增，第六次循環(huán)結(jié)束時，圖中用于構(gòu)建基因表達(dá)載體的DNA片段所占比例是________。

(3) 在構(gòu)建表達(dá)載體的過程中對圖中質(zhì)粒、DNA片段進行合適的完全酶切后，向兩者的混合物中加入DNA連接酶，若只考慮DNA切段兩兩連接，則混合物中將形成________種環(huán)狀DNA。

(4) 2018年11月基因編輯嬰兒事件震驚了世界，輿論一片嘩然，某科研團隊利用“CRISPR/Cas9”技術(shù)將受精卵中的艾滋病病毒受體基因CCR5進行修改，擬培育出具有艾滋病免疫能力的基因編輯嬰兒。下圖3為向?qū)�RNA引導(dǎo)Cas9蛋白切割CCR5基因(目標(biāo)DNA)示意圖。

①向?qū)�RNA的合成需要________酶。Cas9蛋白是一種________酶。

②“GRISPR/Cas9”技術(shù)，是利用________法將Cas9蛋白和特定的引導(dǎo)序列導(dǎo)入受精卵中發(fā)揮基因編輯作用。

③基因編輯嬰兒引起輿論的關(guān)注，很多科學(xué)家表示反對，請給出合理的理由______________。

A.①過程需用纖維素酶和果膠酶的混合物處理

B.②過程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變

C.③過程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能

D.④過程需用適宜配比的生長素和細(xì)胞分裂素處理

（1）圖示中a細(xì)胞是___________，b細(xì)胞是___________�？棺陨砑t細(xì)胞抗體與____________結(jié)合，產(chǎn)生復(fù)合體后被機體自身免疫細(xì)胞消滅，導(dǎo)致貧血。

（2）環(huán)孢素A是一種強效免疫抑制劑，可選擇性抑制T細(xì)胞的功能，常用于治療此疾病。根據(jù)圖示及所學(xué)知識推測，其機理是環(huán)孢素A抑制T細(xì)胞功能，從而抑制___________的分泌，導(dǎo)致B細(xì)胞不能正常增殖分化。

（3）醫(yī)生提示此類免疫抑制劑藥物不能長期大劑量使用，原因是長期大劑量使用會導(dǎo)致T細(xì)胞被抑制，機體的___________免疫降低，易受各種病原體的感染。