Question

16．α-抗胰蛋白酶是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)基因母羊的乳汁中獲得．流程如圖：

（1）目的基因與表達載體用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達載體．
（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力．
（3）將重組表達載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是顯微注射法．為了獲得母羊，移植前需對巳成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行性別鑒定．利用和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體．
（4）檢測目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可采用分子雜交技術(shù)．若要檢測羊乳汁中是否含α-抗胰蛋白酶，需用抗原-抗體雜交法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．

Answer 1

分析 DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
該基因工程需要對羊的性別進行選擇，由于只有母羊能夠分泌乳汁，因此選擇母羊的胚胎進行移植．

解答 解：（1）基因工程的工具酶包括限制酶和DNA連接酶，目的基因與表達載體用同種限制酶切割后，形成相同的黏性末端，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達載體．
（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力．
（3）將重組表達載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是顯微注射法．為了獲得母羊，移植前需對巳成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行性別鑒定．利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體．
（4）檢測目的基因是否已轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可采用分子雜交技術(shù)．若要檢測羊乳汁中是否含α-抗胰蛋白酶，需用抗原-抗體雜交法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．
故答案為：
（1）同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）
（2）超數(shù)排卵獲能（處理）
（3）顯微注射法性別鑒定胚胎分割
（4）分子雜交抗原-抗體雜交

點評 本題考查了基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；明確該基因工程中需要選擇母羊進行胚胎移植；識記細(xì)胞全能性的概念等．要求考生具有扎實的基礎(chǔ)知識，難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的考查．