Question

【題目】酸奶、泡菜的制作都離不開乳酸菌，其代謝產(chǎn)物乳酸菌素（小分子蛋白質(zhì)）和柚皮中的柚皮精油均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。

（1）某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌，分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。分離純化乳酸菌時，首先需要用________對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，分離純化時應(yīng)挑選出_____________的菌落作為候選菌。若用稀釋涂布平板法統(tǒng)計單位體積泡菜液中乳酸菌的數(shù)量，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目______，原因是_________________________________________________。

（2）通常不用水中蒸餾法提取柚皮精油，是因為_________________________________________，該過程得到的糊狀液體可通過__________初步除去其中的固體物和殘渣。

（3）抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，會出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈。可通過測定透明圈的____________來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

Answer 1

【答案】無菌水 有透明圈 少 當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 原料容易焦糊和有效成分會發(fā)生部分水解 過濾 大小（面積、直徑、數(shù)量）

【解析】

結(jié)合題干信息，為了分離純化乳酸菌，得到單菌落，防止雜菌感染，應(yīng)用無菌水稀釋，通過涂布平板法達(dá)到目的。在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識別和分離；分離純化時應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌。水中蒸餾柚皮易發(fā)生焦糊現(xiàn)象，有效成分檸檬烯容易水解，常用壓榨法提取柚皮精油。

（1）由于泡菜濾液中，乳酸菌的濃度過高，因此若直接培養(yǎng)難以得到單一菌落，進(jìn)而影響后續(xù)實驗效果。為了避免其他菌類影響實驗效果，因此在進(jìn)行泡菜濾液梯度稀釋時應(yīng)使用無菌水。乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸，乳酸會溶解選擇培養(yǎng)基中碳酸鈣而出現(xiàn)透明圈，所以分離純化時應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌。用稀釋涂布平板法統(tǒng)計乳酸菌的數(shù)目，測得的數(shù)目是菌落數(shù)，而一個菌落可能是由一個活細(xì)胞或幾個聚集在一起的活細(xì)胞增殖而成的群體。當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以用稀釋涂布平板法統(tǒng)計單位體積泡菜液中乳酸菌的數(shù)量，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。

（2）水中蒸餾法容易導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解，如果利用水中蒸餾法柚皮易發(fā)生焦糊現(xiàn)象，而且有效成分檸檬烯容易水解，因此一般采用壓榨法提取柚皮精油�？赏ㄟ^過濾法初步除去壓榨液中的固體物和殘渣。

（3）抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，可通過測定以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈的大小來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果，透明圈越大，抑菌效果越好。