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【題目】CAR-T 是一種免疫細胞療法,通過改造人體自身的免疫 T 細胞,實現對癌細胞精確化、個體化的治療。下圖是該療法的原理示意圖。請結合圖示,回答下列問題:

1)該療法的第一步需要從患者機體采血,分離出 T 細胞,放入_____________ (儀器)中保溫培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中除了添加糖、氨基酸等必要的營養(yǎng)成分外,往往還添加動物血清,原因是 _________。

2)然后,在體外利用一種樹突狀細胞(可以呈遞癌細胞抗原的一種吞噬細胞),將 T 細胞激活,使其增殖并分化為________ 。

3)理論上,構建的基因組文庫中含有生物的 ______基因。在體外利用 DNA 重組技術,將編碼癌細胞抗原受體(AR)的基因插入到某種病毒的 DNA 中,使病毒作為 AR ____________,在感染激活的 T 細胞時,將 AR 基因整合到 T 細胞的_____ 中。

4T 細胞表面嵌合了 AR,就成為 CAR-T 細胞,通常采用 ______________________ 技術檢測AR 基因是否在 T 細胞中轉錄成功。CAR-T 再經過必要的質量檢測,回輸至患者體內,該方法采用的是自身 T 細胞,而不用異體 T 細胞,其原因是______。

【答案】二氧化碳培養(yǎng)箱 動物血清營養(yǎng)成分比較齊全,可以彌補人工培養(yǎng)基的不足 記憶細胞和效應T細胞 全部 (運)載體 染色體DNA 分子雜交 避免(免疫)排斥反應

【解析】

1、基因文庫是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段,導入到受體菌的群體中儲存,各個受體菌分別含有這種生物的不同基因。基因組文庫包含某種生物所有的基因;部分基因文庫包含某種生物的部分基因,如:cDNA文庫。

2、基因表達載體的構建:①過程:用同一種限制酶切割目的基因和運載體,再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。②目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用。③基因表達載體的組成:目的基因+啟動子+終止子+標記基因。

3、將目的基因導入受體細胞:根據受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

4、目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

5、動物細胞培養(yǎng)的條件:(1)無菌無毒的環(huán)境,可以進行滅菌處理和加入一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液,避免代謝產物的積累;(2)營養(yǎng)條件:添加糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽和微量元素等,除外一般還需要添加血清、血漿等;(3)溫度和pH值(4)氣體環(huán)境:95%的空氣和5%的二氧化碳。

1)分離出 T 細胞,進行動物細胞培養(yǎng)的過程應該將細胞放入二氧化碳培養(yǎng)箱中保溫培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中除了添加糖、氨基酸等必要的營養(yǎng)成分外,往往還添加動物血清或血漿等天然成分,因為動物血清營養(yǎng)成分比較齊全,可以彌補人工培養(yǎng)基的不足。

(2)根據題意,樹突狀細胞為可以呈遞癌細胞抗原的一種吞噬細胞,因此抗原經過吞噬細胞處理后呈遞給T細胞,引起T細胞的增殖與分化形成效應T細胞和記憶細胞。

(3)基因組文庫中含有某種生物的全部基因。在體外利用DNA 重組技術,將編碼癌細胞抗原受體(AR)的基因插入到某種病毒的DNA中,可見病毒作為AR的載體將其運輸到受體細胞(T細胞),導入受體細胞后將AR基因插入到T細胞染色體的DNA上。

4)檢測目的基因是否轉錄,可以采用分子雜交法,即以AR基因作為探針與從受體細胞取出的總mRNA進行雜交,觀察有無雜交帶的出現即可。CAR-T 再經過必要的質量檢測,回輸至患者體內,該方法采用的是自身T細胞,而不用異體T細胞,以避免發(fā)生免疫排斥反應。

練習冊系列答案
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【題目】下圖為質膜的流動鑲嵌模型示意圖,①~④表示組成質膜的物質。請回答([ ]填編號,______填名稱)

1)流動鑲嵌模型中最基本的部分是脂雙層,其主要成分是[ ] _________,由脂雙層組成的膜被稱為_______。質膜具有流動性,但因為[ ]________的存在會降低其流動性,而比較堅實。

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3)④是___________,其與③均與細胞識別有密切的關系。

4)脂雙層使許多分子和離子不能____,膜蛋白控制著某些分子和離子的出入,使質膜具有_______________的功能特性。

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A. a表示垂體,b表示甲狀腺,c表示下丘腦

B. 缺碘地區(qū)人的血液中激素②含量高于正常值

C. 激素③含量增加可通過反饋調節(jié)使①②激素分泌減少

D. a除能分泌激素②外,還能合成分泌抗利尿激素

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1)圖中23、4共同構成了____________________,該現象表明它具有________________特性。

2)在12之間充滿了_________________

3)隨著時間的推移,該細胞將如何變化__________

A.質壁分離 B.質壁分離復原 C.保持目前狀態(tài) D.難以確定

4)死亡的植物細胞還能發(fā)生該現象嗎?___________

5)請在坐標系中畫出細胞的滲透吸水能力隨質壁分離程度的變化曲線__________。

6)紫色洋蔥外表皮不適合作為觀察線粒體的理想實驗材料,為什么?______________________

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