Question

【題目】蘇云金桿菌（Bt）能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒蛋白．如圖是轉(zhuǎn)Bt毒蛋白基因植物的培育過程示意圖（amp′為抗氨芐青霉素基因），①～④表示過程．請據(jù)圖作答：

（1）由HindⅢ酶切后，得到的DNA片段的末端堿基序列是__．

（2）將圖中①所示的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，產(chǎn)生__種DNA片段，②過程可獲得__種重組DNA．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得__種重組DNA．

（3）該過程中Bt毒蛋白基因插入Ti質(zhì)粒后，不應(yīng)影響質(zhì)粒的__．

A．復(fù)制 B．轉(zhuǎn)錄 C．堿基對的數(shù)量D．抗性基因的表達(dá)

（4）用農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒作運(yùn)載體，目的是__．篩選含重組DNA的農(nóng)桿菌，培養(yǎng)基中應(yīng)添加__．

（5）生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是__．

Answer 1

【答案】 4 2 2 ABD 利用農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T﹣DNA，將Bt毒蛋白基因整合到植物細(xì)胞染色體DNA上 氨芐青霉素 降低害蟲種群中抗Bt毒蛋白基因的基因頻率的增長速率

【解析】

分析題圖：圖示表示轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程，其中①是含有目的基因的外源DNA分子，其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位點(diǎn)，且BamHⅠ和BstⅠ的識別序列相同；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程．③表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；④表示目的基因的表達(dá)。

（1）由HindⅢ酶識別序列為切后，因此，得到DNA片段的末端是。

（2）圖①中，從蘇云金桿菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3種DNA片段．而質(zhì)粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2種DNA片段，其中有1種與目的基因相同，所以反應(yīng)管中有4種DNA片段。因HindⅢ、BamHⅠHind切割質(zhì)�？尚纬蓛煞N長度不同的片段，因此用DNA連接酶連接形成的重組質(zhì)粒有2種；而BamHⅠ切割質(zhì)粒只能形成一種長度的片段，但可能會出現(xiàn)正向和反向連接，所以用DNA連接酶能連接形成2種重組質(zhì)粒。

（3）質(zhì)粒要能進(jìn)行復(fù)制才能得到更多的表達(dá)產(chǎn)物，所以構(gòu)建基因表達(dá)載體后，不能影響質(zhì)粒的復(fù)制、表達(dá)和抗性基因的表達(dá)，故選ABD。

（4）用農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒作運(yùn)載體，目的是利用農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T﹣DNA，將Bt毒蛋白基因整合到植物細(xì)胞染色體DNA上。篩選含重組DNA的農(nóng)桿菌，培養(yǎng)基中應(yīng)添加氨芐青霉素。

（5）生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中抗Bt毒蛋白基因的基因頻率的增長速率。