Question

【題目】環(huán)境中大量的尿素存在會造成污染環(huán)境；土壤中有一些細菌含有脲酶，可通過降解尿素產(chǎn)生氨，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色。某研究小組從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌，用以回收氮源同時凈化環(huán)境。

（1）在培養(yǎng)產(chǎn)脲酶菌株在內(nèi)的異養(yǎng)微生物時，培養(yǎng)基營養(yǎng)成分應(yīng)包括水和__________（用序號組合回答）。

①蔗糖 ②尿素 ③生長因子 ④葡萄糖 ⑤無機鹽

圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程，請據(jù)圖回答：

（2）分離培養(yǎng)細菌時必須進行無菌操作，培養(yǎng)基的滅菌一般采用__________法。配制培養(yǎng)基時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是_____________。

（3）從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌，下列實驗操作正確的______________。

A.將土壤用無菌水稀釋，此過程在超凈操作臺上操作

B.將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上

C.可用加酚紅指示劑選擇培養(yǎng)基篩選分解尿素的細菌

D.可將固體培養(yǎng)基直立放入適宜溫度的恒溫箱中培養(yǎng)3-4天

（4）利用產(chǎn)脲酶細菌生產(chǎn)分泌性脲酶，以下符合該酶分離純化的正確流程是____________。

②冷凍干燥 ①制成酶制劑 ③發(fā)酵液過濾 ④層析法提純蛋白酶

Answer 1

【答案】①②③⑤/②③④⑤ 高壓蒸汽滅菌 先調(diào)pH后滅菌 ABC ③④②①

【解析】

培養(yǎng)基的基本成分是水、無機鹽、碳源和氮源；制培養(yǎng)基時，為防止雜菌感染，應(yīng)先調(diào)PH后滅菌。

（1）在培養(yǎng)產(chǎn)脲酶菌株在內(nèi)的異養(yǎng)微生物時，培養(yǎng)基營養(yǎng)成分應(yīng)包括水、無機鹽、碳源（蔗糖或葡萄糖）、生長因子，以尿素作為唯一的氮源。

（2）培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法。配制培養(yǎng)基時，為防止雜菌感染，應(yīng)先調(diào)PH后滅菌。

（3）從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌，根據(jù)題圖可知實驗所用接種方法為稀釋涂布平板法，因此正確操作是：將土壤用無菌水稀釋，此過程在超凈操作臺上操作，A正確； B.將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上，B正確； C.可用加酚紅指示劑選擇培養(yǎng)基篩選分解尿素的細菌，C正確；D.可將固體培養(yǎng)基倒置放入適宜溫度的恒溫箱中培養(yǎng)3-4天，D錯誤。

（4）用產(chǎn)脲酶細菌生產(chǎn)分泌性脲酶，該酶分離純化的正確流程是：發(fā)酵液過濾→層析法提純蛋白酶→冷凍干燥→制成酶制劑。