Question

【題目】現(xiàn)代生物技術(shù)常用于篩選特定微生物或突變體等用于工業(yè)生產(chǎn)。該過(guò)程中培養(yǎng)基的配置、培養(yǎng)條件控制、目的菌篩選等都甚為關(guān)鍵。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。

（1）某小組用兩種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解淀粉的細(xì)菌（目標(biāo)菌）。 Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基：在 LB 培養(yǎng)基中加入淀粉（5g/L）。

Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無(wú)機(jī)鹽（適量），淀粉（15g/L）。

①在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是___________________________。

②若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解淀粉的細(xì)菌比例會(huì)下降，其原因是___________________________。

③Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基中加入適量凝固劑后，可用于分離目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，接種時(shí)，應(yīng)采用的方法是___________________________。

（2）下表是兩種細(xì)菌在以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上培養(yǎng)后測(cè)出的相應(yīng)指標(biāo)，據(jù)表可知細(xì)菌___________________________分解淀粉能力較強(qiáng)，原因是___________________________。

（3）進(jìn)行某些菌種保存時(shí)， 需要制備空白斜面， 其中一個(gè)關(guān)鍵步驟就是在滅菌___________________________（填“前”或“后”）把 LB___________________________(填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基分裝到多個(gè)試管。

（4）進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，往往采用由大量元素、微量元素和有機(jī)成分組成的 MS 培養(yǎng)基。發(fā)芽培養(yǎng)基往往需在 MS 培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加萘乙酸、芐基腺嘌呤、蔗糖和___________________________后制備而成。

Answer 1

【答案】蛋白胨（或蛋白胨和酵母提取物） 不能降解淀粉的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解淀粉的細(xì)菌能夠增殖 稀釋涂布平板法（涂布分離法） II細(xì)菌 II的透明圈直徑/菌落直徑大于細(xì)菌Ⅰ 前 固體 瓊脂

【解析】

實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度。pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)；

篩選淀粉分解菌需要用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，碘液可以鑒別淀粉分解菌，淀粉分解菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈；

培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三類；

培養(yǎng)基按其特殊用途可分為加富培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基；

常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法；

培養(yǎng)基的成分主要是水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。

（1）①Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基是在LB 培養(yǎng)基中加入了淀粉，LB培養(yǎng)基的成分有牛肉膏、蛋白胨和NaCl，所以提供氮源的物質(zhì)是蛋白胨；

②Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基是以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，故只有能利用碳源的微生物才能存活，不能降解淀粉的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解淀粉的細(xì)菌能夠增殖；

③用于分離目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法是稀釋涂平板法。

（2）根據(jù)表可知細(xì)菌Ⅱ分解淀粉能力較強(qiáng)，原因是細(xì)菌II的透明圈直徑與菌落直徑之比大于細(xì)菌Ⅰ。

（3）進(jìn)行某些菌種保存時(shí)， 需要制備空白斜面， 其中關(guān)鍵步驟就是在滅菌前把 LB固體培養(yǎng)基分裝到多個(gè)試管。

（4）植物組織培養(yǎng)要用固體培養(yǎng)基，所以要在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加上瓊脂。