Question

【題目】癌胚抗原（CEA）是一種位于腫瘤細(xì)胞膜表面的蛋白，白細(xì)胞介素（IL-2）是一種淋巴因子。研究人員利用質(zhì)粒plRES-CEA基因、IL-2基因，分別構(gòu)建了重組質(zhì)粒plRES-CEA．plRES-IL-2和plRES-CEA-IL-2．將實(shí)驗(yàn)小鼠分成6組，每隔5天進(jìn)行一次肌肉注射，共3次。最后一次注射完成7天后，檢測(cè)小鼠體內(nèi)CEA含量、NK 細(xì)胞（即自然殺傷細(xì)胞，可殺傷腫瘤細(xì)胞，而不破壞自身組織細(xì)胞）活性等指標(biāo)，結(jié)果如下表。請(qǐng)回答問(wèn)題：

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到的工具酶有________。要保證重組質(zhì)粒能夠在細(xì)菌中大小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的大量擴(kuò)增，重組質(zhì)粒必須具有______。

（2）注射 plRES-CEA-IL-2后，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的大量CEA是重組質(zhì)粒中的目的基因經(jīng)過(guò) _____和____形成的。

（3）NK細(xì)胞的活性不依賴于抗原刺激，能自發(fā)地溶解多種腫瘤細(xì)胞和被病毒感染細(xì)胞，屬于人體免疫的第________道防線。

（4）從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看， 第 _______組具有最好的特異性免疫效果。對(duì)比第3組和第____________組結(jié)果可以說(shuō)明IL-2有促進(jìn)______的作用。

（5）第1，2, 4組小鼠均可產(chǎn)生CEA抗體，各組之間無(wú)顯著性差異，但與第3組、空載體及白對(duì)照組相比有顯著性差異，說(shuō)明________。

Answer 1

【答案】限制（性核酸內(nèi)切）酶、DNA連接酶 細(xì)菌復(fù)制原點(diǎn) 轉(zhuǎn)錄 翻譯 二 1 5 淋巴細(xì)胞增殖 CEA抗體的產(chǎn)生與導(dǎo)入外源CEA基因，使CEA含量増加有關(guān)

【解析】

免疫系統(tǒng)的三道防線：第一道防線：皮膚、黏膜等；第二道防線：吞噬細(xì)胞和體液中的殺菌物質(zhì)如溶菌酶；第三道防線：特異性免疫包括體液免疫和細(xì)胞免疫。

基因工程的工具：限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體。

實(shí)驗(yàn)的自變量是肌肉注射的成分，因變量是CEA含量、NK細(xì)胞活性、淋巴細(xì)胞數(shù)量。與空白對(duì)照組相比，第1組CEA含量、NK細(xì)胞活性、淋巴細(xì)胞數(shù)量均較高，效果較好。

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到限制酶（在特定的位點(diǎn)打開(kāi)磷酸二酯鍵）和DNA連接酶（連接限制酶切開(kāi)的黏性末端或平末端）。重組質(zhì)粒中含有的細(xì)菌復(fù)制原點(diǎn)可以保證重組質(zhì)粒能夠在細(xì)菌中大小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的大量擴(kuò)增。

（2）注射重組質(zhì)粒plRES-CEA-IL-2后，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的大量CEA蛋白質(zhì)是重組質(zhì)粒中的目的基因表達(dá)的結(jié)果，經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段。

（3）NK細(xì)胞的活性不依賴于抗原刺激，能自發(fā)地溶解多種腫瘤細(xì)胞和被病毒感染細(xì)胞，說(shuō)明NK細(xì)胞發(fā)揮作用屬于非特異性免疫，屬于人體免疫的第二道防線。

（4）第1組CEA含量、NK細(xì)胞活性、淋巴細(xì)胞數(shù)量均較高，具有最好的特異性免疫效果。要想證明IL-2的作用，自變量應(yīng)該為是否含有IL-2，第3組和第5組均含有質(zhì)粒，區(qū)別在于是否含有IL-2，第3組淋巴細(xì)胞數(shù)量較多，可以說(shuō)明IL-2可以促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖。

（5）第1、2、 4組小鼠（均注射有CEA基因）均可產(chǎn)生CEA抗體，各組之間無(wú)顯著性差異，但與第3組、空載體及白對(duì)照組（均未注射CEA基因）相比有顯著性差異，即注射CEA基因組CEA抗體明顯多于未注射CEA基因組，說(shuō)明CEA抗體的產(chǎn)生與導(dǎo)入外源CEA基因，使CEA含量増加有關(guān)。