【題目】pBV220質(zhì)粒是被廣泛應(yīng)用的大腸桿菌載體，結(jié)構(gòu)如下圖所示。其中PRPL是啟動(dòng)子，rrB是基因轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)，Ampr是氨芐青霉素抗性基因，ori是質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn)，EcoRⅠ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ、Pst Ⅰ均為限制性內(nèi)切酶。回答下列問題：

（1）從圖中可看出，pBV220作為運(yùn)載體具備的條件有________________。

（2）將目的基因與此質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，通常用圖中____________兩種限制酶切割此質(zhì)粒，其優(yōu)點(diǎn)是______________________。用這兩種酶可以切開此質(zhì)粒的_____個(gè)磷酸二酯鍵，并且會(huì)____（填“消耗”或“產(chǎn)生”）同樣數(shù)量的水分子。

（3）將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌前，需用__處理大腸桿菌，使之成為________細(xì)胞，以提高轉(zhuǎn)化效率。目的基因是否成功導(dǎo)入大腸桿菌，可采用___________進(jìn)行檢測(cè)。

【答案】 具有多個(gè)限制酶的切割位點(diǎn)、具有標(biāo)記基因 EcoRⅠ、Hind Ⅲ 防止質(zhì)粒切割后自身環(huán)化 4 消耗 Ca2+ 感受態(tài) DNA分子雜交技術(shù)

【解析】試題分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
1、目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕蛭膸�(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）從圖中可看出，pBV220作為運(yùn)載體具備的條件有具有多個(gè)限制性內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)（便于目的基因的插入）、標(biāo)記基因（便于鑒定和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞）。

（2）將目的基因與此質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，通常用圖中EcoRⅠ、HindⅢ兩種限制酶切割此質(zhì)粒，這兩種酶切割產(chǎn)生的末端不同，可以防止質(zhì)粒切割后自身環(huán)化。用這兩種酶可以切開此質(zhì)粒的4個(gè)磷酸二酯鍵，同時(shí)且消耗4個(gè)水分子。

（3）基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌前，需用Ca2+處理大腸桿菌，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，以提高轉(zhuǎn)化效率。目的基因是否成功導(dǎo)入大腸桿菌，可采用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)與各系統(tǒng)的功能聯(lián)系示意圖，請(qǐng)回答相關(guān)問題。

（1）a表示___________，b表示______________，c表示_______________系統(tǒng)，代謝廢物除了從c排出，還可以從___________排出。

（2）CO2不從組織液進(jìn)入組織細(xì)胞的原因是_________________________。

（3）病人因呼吸受阻，肌細(xì)胞會(huì)因無氧呼吸產(chǎn)生大量乳酸，乳酸進(jìn)入血液后，會(huì)使血液pH_____________，但乳酸可以與血液中的NaHCO3發(fā)生反應(yīng)，使血液的pH維持相對(duì)穩(wěn)定。

（4）外界中的O2進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)共穿過________層生物膜

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】控制不同性狀的基因之間進(jìn)行重新組合,稱為基因重組。下列各選項(xiàng)中能夠體現(xiàn)基因重組的是。

A. 利用人工誘變的方法獲得青霉素高產(chǎn)菌株

B. 利用基因工程手段培育生產(chǎn)人干擾素的大腸桿菌

C. 在海棠枝條上嫁接蘋果的芽,海棠和蘋果之間實(shí)現(xiàn)基因重組

D. 二倍體與四倍體雜交后獲得的三倍體無子西瓜

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下面兩圖為某種動(dòng)物細(xì)胞分裂過程中的坐標(biāo)圖和細(xì)胞圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖甲中的②為_______數(shù)目變化；b階段為__________分裂過程；c階段中除了有絲分裂過程外，還包括_____________過程。

（2）圖乙中D的子細(xì)胞名稱是_____________。

（3）圖乙中C對(duì)應(yīng)圖甲中的時(shí)期是_________段。（用大寫字母表示）

（4）在圖甲中，如果將A點(diǎn)時(shí)的全部核DNA用放射性同位素標(biāo)記，而分裂過程中所用的原料中沒有放射性同位素，則在GH段可檢測(cè)到有放射性的脫氧核苷酸鏈占___________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】基因工程的操作步驟:①將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,②使目的基因與運(yùn)載體相結(jié)合,③檢測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求,④提取目的基因。正確的操作順序是

A. ③②④① B. ④②①③

C. ④①②③ D. ③④①②

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖表示某植物在不同光照強(qiáng)度下，單位時(shí)間內(nèi)CO2釋放量和O2產(chǎn)生總量的相對(duì)變化。下列說法不正確的是（　�。�

A. 光照強(qiáng)度為a時(shí)，細(xì)胞呼吸強(qiáng)度為單位時(shí)間產(chǎn)生6單位CO2

B. 光照強(qiáng)度為b時(shí)，呼吸作用強(qiáng)度是光合作用強(qiáng)度的2倍

C. 光照強(qiáng)度為c時(shí)，光合作用強(qiáng)度是呼吸作用強(qiáng)度的2倍

D. 光照強(qiáng)度為d時(shí)，植物單位時(shí)間內(nèi)從環(huán)境中吸收2單位CO2

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】同在熱帶地區(qū)，但是卻可能形成熱帶雨林、熱帶季雨林、熱帶稀樹草原、熱帶荒漠等不同的生物群落，起決定作用的環(huán)境條件為（　　）

A. 陽(yáng)光 B. 溫度 C. 水分 D. 空氣

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】

（1）選用小蚌蘭下表皮作實(shí)驗(yàn)材料的優(yōu)點(diǎn)是 ，植物細(xì)胞原生質(zhì)層的選擇透過性取決于 （結(jié)構(gòu)）。

（2）實(shí)驗(yàn)步驟④的正確操作方法是 。

（3）換用高倍物鏡觀察時(shí)，應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng) 進(jìn)行調(diào)焦。

（4）小蚌蘭葉片下表皮細(xì)胞液滲透壓與濃度在 之間的蔗糖溶液相當(dāng)。

（5）結(jié)果表明，細(xì)胞 導(dǎo)致氣孔關(guān)閉。這種現(xiàn)象在自然界中對(duì)植物體生存的意義是 。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列關(guān)于糖類的敘述，錯(cuò)誤的是

A. 葡萄糖和麥芽糖分子均有還原性 B. 乳糖和淀粉均可被水解

C. 構(gòu)成蔗糖的單位是葡萄糖和果糖 D. 肌糖原可水解使血糖升高

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