Question

【題目】人參是珍貴的藥用植物，研究人員運(yùn)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)構(gòu)建乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人參細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，為珍貴藥用植物與疫苗聯(lián)合應(yīng)用開(kāi)辟了新思路，其構(gòu)建過(guò)裎如圖所示，圖中SmaⅠ、SstⅠ、EcoRV為限制酶。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）②的構(gòu)建過(guò)程除限制酶外還需要_________酶；想要從②中重新獲得HBsAg基因，所用的限制酶不能是EcoRV或SmaⅠ，原因是_____________________________。

（2）將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌常用__________處理細(xì)胞；要使目的基因成功整合到人參細(xì)胞的染色體上，該過(guò)程所采用的質(zhì)粒應(yīng)含有____________________。

（3）分析圖可知，②中應(yīng)含有的標(biāo)記基因是_______________；過(guò)程⑤的目的是______________。

（4）該疫苗進(jìn)入機(jī)體后可刺激機(jī)體產(chǎn)生能與乙肝病毒特異性結(jié)合的_____________，同時(shí)還能產(chǎn)生______使機(jī)體長(zhǎng)期對(duì)乙肝病毒具有免疫力。

Answer 1

【答案】 DNA連接 兩平末端連接后的重組序列不能再被EcoR V和Sma Ⅰ識(shí)別（重組質(zhì)粒無(wú)這種限制酶的識(shí)別序列） 鈣離子（Ca2+) T-DNA 氨芐青霉素抗性基因 篩選出含有HBsAg基因的人參細(xì)胞 抗體 記憶細(xì)胞

【解析】試題分析：本題主要考查基因工程、免疫調(diào)節(jié)。要求學(xué)生熟知基因工程的操作過(guò)程，尤其是限制酶的選擇，以及體液免疫的過(guò)程。

（1）②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，除需要限制酶外還需要DNA連接酶；EcoRV、SmaⅠ切割后得到的是平末端，然后用DNA連接酶連接后，所形成的重組序列不能再被EcoR V和Sma Ⅰ識(shí)別。

（2）將目的基因轉(zhuǎn)入微生物的方法是鈣離子處理細(xì)胞；農(nóng)桿菌的質(zhì)粒中含有一段可以轉(zhuǎn)移的DNA，即T-DNA，它能將目的基因成功整合到人參細(xì)胞的染色體上。

（3）⑤過(guò)程中是將受體細(xì)胞放入氨芐青霉素中培養(yǎng)，以篩選出含有HBsAg基因的人參細(xì)胞，因此②中應(yīng)含有的標(biāo)記基因是氨芐青霉素抗性基因。

（4）在體液免疫中，疫苗可以刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，同時(shí)還能產(chǎn)生記憶細(xì)胞使機(jī)體長(zhǎng)期對(duì)乙肝病毒具有免疫力。