Question

【題目】當(dāng)將一段人類DNA胰島素基因片段接合到細(xì)菌的DNA中時(shí)，細(xì)菌就會(huì)開始產(chǎn)生人的胰島素。

（1）此工程屬于_____________（動(dòng)物/植物/微生物）基因工程。

（2）上述基因工程中，導(dǎo)入細(xì)菌的重組DNA分子的組成應(yīng)該是_____________。

A.人類胰島素基因+細(xì)菌基因

B.人類胰島素基因+細(xì)菌基因+運(yùn)載體

C.人類胰島素基因+DNA連接酶

D.人類胰島素基因+運(yùn)載體

為了解基因結(jié)構(gòu)，通常選取一特定長(zhǎng)度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術(shù)將單酶水解片段分離，計(jì)算相對(duì)大小；然后再用另一種酶對(duì)單酶水解片段進(jìn)一步降解， 分析片段大小。下列是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

已知一線性DNA序列共有5 000bp （bp為堿基對(duì)）	第一步水解	產(chǎn)物（單位：bp）	第二步水解	產(chǎn)物（單位:bp）
	E酶切割	2100	第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用F酶切割	1900 200
		1400		800 600
		1000		1000
		500		500
	F酶切割	2500	將第一步水解產(chǎn)物分離后分別用E酶切割	1900 600
		1300		800 500
		1200		1000 200
	經(jīng)E酶和F 酶同時(shí)切割	1900 1000 800 600 500 200

（3）該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)主要體現(xiàn)了_____________原則。

（4）根據(jù)表中數(shù)據(jù)，下圖中標(biāo)出了相應(yīng)限制性酶的酶切位點(diǎn)，正確的是_____________。

A.

B.

C.

D.

（5）據(jù)左圖、右圖可知，為高效利用F酶的酶切作用，反應(yīng)溫度最好控制在____________。

A. 50°C B. 60°C

C. 70°C D. 80°C

你的判斷理由是________________________________________________。

Answer 1

【答案】微生物 D 對(duì)照（單一變量） C B 由左圖可知，當(dāng)溫度為60°C70°C時(shí)，酶活性較高，而由右圖可知70°C時(shí)保溫30分鐘，酶活性開始減弱，而60°C保溫30分鐘后 酶活性基本不發(fā)生變化，由此可知為高效利用F酶，反應(yīng)溫度最好應(yīng)控制在60°C

【解析】

限制性核酸內(nèi)切酶是可以識(shí)別DNA的特異序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱限制酶。由表格分析可知E酶切割后有4段產(chǎn)物，說明酶E有3個(gè)切割位點(diǎn)；F酶切割后有3段產(chǎn)物，說明酶F有2個(gè)切割位點(diǎn)。

（1）該基因工程的受體細(xì)胞是細(xì)菌，故此工程屬于微生物基因工程。

（2）上述基因工程中，目的基因是人類胰島素基因，需要用運(yùn)載體導(dǎo)入細(xì)菌，故導(dǎo)入細(xì)菌的重組DNA分子的組成應(yīng)該是人類胰島素基因+運(yùn)載體，故選D。

（3）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的基本原則要有對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

（4）E酶切割后有4段產(chǎn)物，說明酶E有3個(gè)切割位點(diǎn)；F酶切割后有3段產(chǎn)物，說明酶F有2個(gè)切割位點(diǎn)。由表中酶切割后片段長(zhǎng)度可知，1900+600=2500，800+500=1300，1000+200=1200，所以連接如C圖所示，故選C。

（5）由左圖可知，當(dāng)溫度為60°C70°C時(shí)，酶活性較高，而由右圖可知70°C時(shí)保溫30分鐘，酶活性開始減弱，而60°C保溫30分鐘后 酶活性基本不發(fā)生變化，由此可知為高效利用F酶，反應(yīng)溫度最好應(yīng)控制在60°C，故選B。