Question

【題目】為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進行了細(xì)菌分離等工作。回答下列問題：

（1）通常培養(yǎng)基采用____________法滅菌；在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時，待平板冷卻至_______左右時，應(yīng)將平板倒過來放置，這樣做的目的是___________________________。

（2）該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是____________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為___________。

（3）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時，接種環(huán)通過___________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是__________________。

（4）示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

（5）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 50℃ 防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染 檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8×107 灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 B 溶解氧 營養(yǎng)物質(zhì)

【解析】

本題是對微生物實驗室培養(yǎng)過程中對實驗用品進行滅菌常用的方法及檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底的方法、估算樣品中菌株數(shù)的方法、微生物常用的接種方法和具體操作步驟的綜合性考查，回憶和梳理相關(guān)知識點，尤其是一些實驗的細(xì)節(jié)，據(jù)此答題。

（1）微生物培養(yǎng)過程應(yīng)該進行無菌操作，配制的培養(yǎng)基要進行高壓蒸汽滅菌；倒平板操作的最適溫度為培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，倒平板的作用是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

（2）為了檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底，應(yīng)該取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間。根據(jù)題意分析，3個平板的菌落數(shù)分別是39、38和37，且稀釋了100倍，體積為0.1mL，因此每升水樣中的活菌數(shù)=（39+38+37）÷3÷0.1×100×1000=3.8×107個。

（3）在平板劃線法分離菌種的過程中，對接種環(huán)常用的滅菌方法是灼燒滅菌；在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落。

（4）據(jù)圖分析，圖中A表示平板劃線法，B表示稀釋涂布平板法。

（5）根據(jù)題意分析，振蕩培養(yǎng)不僅提高了培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，這樣可以提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，使細(xì)菌生長速度加快。