Question

【題目】回答下列有關(guān)微生物的問(wèn)題。

苯酚（C6H5OH）是廣泛存在于化工行業(yè)廢水中的一種污染物。為了分離和純化高效分解苯酚的細(xì)菌�？蒲腥藛T進(jìn)行了下圖所示的相關(guān)試驗(yàn)。（實(shí)驗(yàn)中的LB培養(yǎng)基能使菌種成倍增加）

（1）該實(shí)驗(yàn)需要用到的實(shí)驗(yàn)儀器有：錐形瓶、培養(yǎng)皿、_________________（寫出2種即可，但必須是微生物培養(yǎng)專用）。

（2）理論上，步驟②中的LB培養(yǎng)基含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)除了碳源外，還有__________等。

A. 氮源 B. 激素 C. 酶 D. 生長(zhǎng)因子 E.伊紅美藍(lán)

（3）步驟③培養(yǎng)基成分中的苯酚作為細(xì)菌培養(yǎng)唯一的____________；步驟③和④中的培養(yǎng)基最主要的成分差異是后者添加了____________。步驟②、③、④的培養(yǎng)基必須經(jīng)過(guò)滅菌，其具體要求是____________。

（4）經(jīng)步驟④培養(yǎng)后的菌落如圖，則接種時(shí)甲、乙、丙三個(gè)區(qū)域的操作順序是____________。多次劃線后，最終可以得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的____________。

（5）步驟④的目的是____________；經(jīng)過(guò)步驟⑤培養(yǎng)后，應(yīng)該從殘余苯酚濃度___________的培養(yǎng)瓶中再分離、再培養(yǎng)目的菌株。

Answer 1

【答案】高壓滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、接種環(huán)（針） A、D 碳源 瓊脂 121℃，1.05kg/cm2，15~30分鐘 甲--乙--丙 單個(gè)菌落 分離純化 最低

【解析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株；微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長(zhǎng)因子；篩選菌株的過(guò)程要使用選擇培養(yǎng)基，操作過(guò)程中要注意無(wú)菌操作；常用的固體培養(yǎng)基上接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法，微生物計(jì)數(shù)可用稀釋涂布平板法和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法；滅菌的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。

（1）微生物分離實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中常用的儀器有錐形瓶、培養(yǎng)皿、高壓滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、接種環(huán)（針）等。

（2）步驟②中的LB培養(yǎng)基中必須添加的微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長(zhǎng)因子，故選AD。

（3）該實(shí)驗(yàn)中，苯酚作為細(xì)菌培養(yǎng)唯一的碳源；步驟③和④中的培養(yǎng)基分別是液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，因此兩者最主要的成分差異是后者添加了瓊脂；步驟②、③、④的培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌，其具體要求是121℃，1.05kg/cm2，15～30分鐘。

（4）利用平板劃線法接種時(shí)，隨著劃線次數(shù)的增加，細(xì)菌數(shù)目逐漸減少，因此圖中劃線順序應(yīng)為甲→乙→丙，最終可以得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的單個(gè)菌落。
（5）步驟④的目的是分離純化；經(jīng)過(guò)步驟⑤培養(yǎng)后，應(yīng)該從殘余苯酚濃度最低的培養(yǎng)瓶中再分離、再培養(yǎng)目的菌株。