Question

【題目】下圖為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程圖，其中質(zhì)粒上的PstI、SmaI、EcoRI、ApaI 等四種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見下表。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

限制酶	Apa I	EcoR I	Pst I	Sma I
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)

（1）形成重組質(zhì)粒A時(shí)，應(yīng)選用限制酶__________對(duì)質(zhì)粒和含有抗病基因的DNA 進(jìn)行切割。

（2）一個(gè)質(zhì)粒被限制酶EcoRI、PstI、SmaI 同時(shí)切割后，可得到的DNA片段的數(shù)目和黏性末端的數(shù)目分別是__________。

（3）圖中①②所用的培養(yǎng)基應(yīng)考慮植物激素的__________。（寫出2 個(gè)即可）

（4）在轉(zhuǎn)基因抗病香蕉培育過程中涉及到的生物工程技術(shù)有__________。（寫出2個(gè)即可）

Answer 1

【答案】PstI和EcoRI 3、4 種類、含量和比例 體外DNA重組技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)等

【解析】

基因工程是狹義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo)，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按照一定的程序進(jìn)行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞也稱（宿主）細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面。

（1）目的基因上有EcoRI、PstI、SmaI三個(gè)酶切位點(diǎn)，SmaI會(huì)破壞目的基因，因此形成重組質(zhì)粒A時(shí)，應(yīng)選用限制酶PstI和EcoRI對(duì)質(zhì)粒和含有抗病基因的DNA 進(jìn)行切割。

（2）一個(gè)質(zhì)粒被限制酶EcoRI、PstI、SmaI 同時(shí)切割后，有三個(gè)酶切位點(diǎn)，可得到的DNA片段的數(shù)目是3，黏性末端的數(shù)目是4，SmaI切割后是平末端。

（3）圖中①②是脫分化和再分化的過程，所用的培養(yǎng)基應(yīng)考慮植物激素的種類、含量和比例，以適應(yīng)不同階段的需要。

（4）在轉(zhuǎn)基因抗病香蕉培育過程中涉及到的生物工程技術(shù)有體外DNA重組技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)等。