【題目】蛋白酶廣泛用于化工、食品、醫(yī)藥工業(yè)，因此采用生物工程技術(shù)規(guī)�；a(chǎn)重組蛋白酶具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值。已知某蛋白酶編碼基因的兩端分別為KpnI和ClaI限制酶酶切位點(diǎn)，現(xiàn)將之插入在質(zhì)粒pCLY9合適位點(diǎn)處（圖1），并導(dǎo)入大腸桿菌L44株中高效表達(dá)。L44株因缺乏gatB基因不能以NH4Cl為原料合成重要的細(xì)胞大分子，而且對(duì)氯霉素（Cm）敏感。

（1）若用ClaI和KpnI 酶切pCLY9可獲得0.8和4.8kb兩種片段；而用KpnI和SmaI酶切重組質(zhì)�？色@得2.5和3.1kb兩種片段，那么目的基因的大小是_____kb。

（2）為了獲得含重組質(zhì)粒的細(xì)胞，應(yīng)采用兩步法篩選。其中用于第一步篩選的固體培養(yǎng)基的配方是_____。

A．蛋白胨、酵母粉、牛肉膏

B．葡萄糖、NH4Cl、生長(zhǎng)因子

C．牛肉膏、酵母粉、NH4Cl、氯霉素

D．葡萄糖、蛋白胨、生長(zhǎng)因子、氯霉素

（3）上述含重組質(zhì)粒的大腸桿菌經(jīng)大規(guī)模培養(yǎng)后，破碎菌體獲得細(xì)胞裂解液。圖2是裂解液中多種酶活性隨溫度變化的趨勢(shì)，由此可以判斷該重組蛋白酶在實(shí)際應(yīng)用中的最佳反應(yīng)溫度范圍應(yīng)從_____℃到_____℃。

（4）一般而言，固定化處理能不同程度地提高酶的熱穩(wěn)定性。若將上述大腸桿菌細(xì)胞裂解液不經(jīng)分離純化直接固定化，能否充分體現(xiàn)這種蛋白酶的使用優(yōu)勢(shì)？_____，為什么？_____。

（5）本大題中所涉及的生物工程包括_____。

A．基因工程 B．細(xì)胞工程 C．發(fā)酵工程 D．酶工程

【答案】0.8 A 55 70 不能 雜酶也會(huì)因固定化而變得熱穩(wěn)定，這樣不便與高溫蛋白酶的活性相隔離 ACD

【解析】

1、獲得目的基因的方法：①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取 ②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增 ③人工合成（化學(xué)合成）．原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成。

2、“分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）

（1）來(lái)源：主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。

（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專一性。

3、基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用�；虮磉_(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因，標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。

（1）由題意知：用ClaI和KpnI 酶切pCLY9可獲得0.8和4.8kb兩種片段，而用KpnI和SmaI酶切重組質(zhì)�？色@得2.5和3.1kb兩種片段，說(shuō)明質(zhì)粒的長(zhǎng)度為5.6kb，目的基因的大小是0.8kb。

（2）采用兩步法篩選獲得含重組質(zhì)粒的細(xì)胞，第一步篩選的固體培養(yǎng)基含有蛋白胨、酵母粉、牛肉膏，故選A。

（3）由圖2可知：在30℃到55℃，雖然重組蛋白酶活性高，但其余雜酶的活性也高，故該重組蛋白酶在實(shí)際應(yīng)用中的最佳反應(yīng)溫度范圍應(yīng)從55℃到70℃。

（4）由于雜酶也會(huì)因固定化而變得熱穩(wěn)定，這樣不便與高溫蛋白酶的活性相隔離，故若大腸桿菌細(xì)胞裂解液不經(jīng)分離純化直接固定化，不能充分體現(xiàn)該蛋白酶的使用優(yōu)勢(shì)。

（5）本題涉及基因工程、發(fā)酵工程及酶工程的相關(guān)知識(shí)，故選ACD。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】如圖表示某神經(jīng)元一個(gè)動(dòng)作電位傳導(dǎo)示意圖，據(jù)圖分析正確的是（ ）

A.動(dòng)作電位傳導(dǎo)是局部電流觸發(fā)鄰近細(xì)胞膜依次產(chǎn)生新的電位變化的過(guò)程

B.圖中a→b→c的過(guò)程就是動(dòng)作電位快速形成和恢復(fù)的過(guò)程

C.d處于興奮狀態(tài)，膜內(nèi)只有陽(yáng)離子

D.a處于靜息狀態(tài)，膜對(duì)Na+的通透性比較大

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】若圖中甲、乙兩圖均表示人體生命活動(dòng)調(diào)節(jié)過(guò)程中細(xì)胞之間的信息傳遞方式，則以下相關(guān)敘述中不正確的是

A．細(xì)胞2、細(xì)胞4依靠細(xì)胞表面的糖蛋白識(shí)別信息

B．信息從細(xì)胞3傳遞到細(xì)胞4的速度比從細(xì)胞1傳遞到細(xì)胞2快

C．若細(xì)胞1為下丘腦中的分泌細(xì)胞，產(chǎn)生的激素作用的靶細(xì)胞———細(xì)胞2是甲狀腺細(xì)胞

D．人體對(duì)寒冷的反應(yīng)與乙圖所示調(diào)節(jié)有關(guān)，也與甲圖所示的調(diào)節(jié)有關(guān)

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】如圖是某生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)圖，其中編號(hào)①表示的化合物是（　�。�

A.DNAB.磷脂C.RNAD.蛋白質(zhì)

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】圖1是某動(dòng)物細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)示意圖．該細(xì)胞在有絲分裂時(shí)，母細(xì)胞中的姐妹染色單體均須附著于紡錘絲上，這稱為雙定向作用．一種稱為紡錘體裝配檢查點(diǎn)（SAC）的監(jiān)控機(jī)制能監(jiān)視紡錘絲附著過(guò)程，一旦發(fā)現(xiàn)如圖2所示的異�，F(xiàn)象，便暫停姐妹染色單體的分離和有絲分裂的繼續(xù)進(jìn)行，直到雙定向作用完成才能繼續(xù)進(jìn)行分裂。

（1）圖1結(jié)構(gòu)①的主要物質(zhì)組成是_____。

（2）為圖2中染色體移動(dòng)提供能量的是圖1中的_____。（填圖中編號(hào)）

（3）圖2中細(xì)胞所處的分裂時(shí)期是_____，理由是_____。（至少寫出兩點(diǎn)）

（4）若某基因型為Aa的細(xì)胞進(jìn)行圖2所示的細(xì)胞分裂，則正常情況下，一個(gè)子細(xì)胞獲得基因A，另一個(gè)子細(xì)胞相同染色體相同位點(diǎn)的基因應(yīng)該是_____。

（5）根據(jù)題干信息和圖2，判斷MCC對(duì)APC的作用是_____（促進(jìn)/抑制），理由是_____。

（6）若紡錘體裝配檢查點(diǎn)（SAC）的監(jiān)控機(jī)制失常，將產(chǎn)生變異的子細(xì)胞．下列對(duì)該變異現(xiàn)象的描述正確的是_____．

A．子細(xì)胞染色體數(shù)目發(fā)生變化

B．子細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)發(fā)生變化

C．該變異僅發(fā)生在有絲分裂中

D．該變異僅發(fā)生在減數(shù)分裂中

E．該變異在有絲分裂或減數(shù)分裂中均可能發(fā)生

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】如圖表示人體縮手反射的相關(guān)結(jié)構(gòu)(虛線內(nèi)表示脊髓的部分結(jié)構(gòu))，有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是

A. 要檢測(cè)反射弧是否完整和正常，可在⑤處給予適宜的電刺激

B. 若抑制某神經(jīng)元的呼吸作用，將會(huì)影響神經(jīng)興奮的傳遞

C. 興奮在神經(jīng)元之間傳遞時(shí)，都存在化學(xué)信號(hào)與電信號(hào)的轉(zhuǎn)換

D. 在②處給予適宜的電刺激，大腦皮層會(huì)產(chǎn)生痛覺(jué)

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】如圖為蛙的坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本，在坐骨神經(jīng)上放置兩個(gè)電極(b，c)，并且將這兩個(gè)電極連接到一個(gè)電表上。下列敘述正確的是( )

A.刺激 a 點(diǎn)肌肉會(huì)收縮，這是一種反射活動(dòng)

B.刺激 a 點(diǎn)，電表的指針會(huì)發(fā)生兩次方向相同的偏轉(zhuǎn)

C.只有在 b 點(diǎn)左側(cè)刺激，才能觀察到電表指針向左偏轉(zhuǎn)

D.靜息時(shí)，電表指針沒(méi)有偏轉(zhuǎn)，說(shuō)明 b、c 兩點(diǎn)電位相等

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】信號(hào)分子是生物體內(nèi)不同細(xì)胞間進(jìn)行信息傳遞的物質(zhì)，如動(dòng)物激素、神經(jīng)遞質(zhì)、淋巴因子等�；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題:

（1）人的神經(jīng)系統(tǒng)中有些神經(jīng)細(xì)胞既能傳導(dǎo)興奮,又能合成和分泌激素.這樣的細(xì)胞位于_____

(部位)。

（2）神經(jīng)遞質(zhì)是由神經(jīng)細(xì)胞分泌的信號(hào)分子，它作用的靶細(xì)胞可以是另一個(gè)神經(jīng)細(xì)胞,也可以是_______；神經(jīng)遞質(zhì)可以使靶細(xì)胞興奮或受抑制，若抑制靶細(xì)胞,則靶細(xì)胞的膜電位及變化是_________。

（3）淋巴因子是由________分泌的，它作用于 B 細(xì)胞，B 細(xì)胞同時(shí)在______的刺激下 ,增殖、分化形成_________。

（4）信號(hào)分子發(fā)揮作用之前需要與靶細(xì)胞上的受體結(jié)合,有的需要穿過(guò)靶細(xì)胞膜,有的則不需要.如神經(jīng)遞質(zhì)_____(填“需要”或“不需要”)穿過(guò)靶細(xì)胞膜。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】圖示不同培養(yǎng)階段酵母菌數(shù)量、葡萄糖濃度和乙醇濃度的變化曲線，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（　�。�

A.曲線AB段酵母菌呼吸作用發(fā)生的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體

B.曲線BC段酵母菌呼吸的方式為無(wú)氧呼吸

C.C→D酵母菌數(shù)量下降，其原因有：葡萄糖大量消耗、乙醇含量過(guò)高、溶液pH下降

D.T1一T2，單位時(shí)間內(nèi)酵母菌消耗葡萄糖量迅速增加的原因可能是酵母菌數(shù)量增多

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