Question

【題目】富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中的最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是利用不同微生物生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，制定環(huán)境條件，使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長(zhǎng)，從而使其數(shù)量大大增加。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對(duì)羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題。

（1）①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是_____________________________________________。

（2）若實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”的代謝類型是______________；振蕩培養(yǎng)的另一個(gè)目的是_______________________。

（3）⑤的菌落中大部分是降解_______________微生物。設(shè)置⑥的目的是________________ 。

（4）⑤→⑥采用單細(xì)胞挑取法，將所選菌種接種到⑥的培養(yǎng)基中，在此操作過(guò)程中如何防止雜菌污染(至少寫(xiě)出兩點(diǎn))。_____________________________________________________

（5）若研究“目的菌”的群體生長(zhǎng)規(guī)律，將單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，可采用____________的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。若以血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)“目的菌”的數(shù)量，以一個(gè)大方格(體積為0.1 mm3)有25個(gè)中方格的計(jì)數(shù)板為例進(jìn)行計(jì)算，設(shè)五個(gè)中方格中總菌數(shù)為B，菌液稀釋倍數(shù)為C，那么原菌液的菌群密度為____________個(gè)/mL。

（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉，以免____________________；滅菌是指________________________________________。

Answer 1

【答案】 擴(kuò)大培養(yǎng)(使分解對(duì)羥基苯甲酸微生物的比例增高) 異養(yǎng)需氧型 讓目的菌充分利用培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 對(duì)羥基苯甲酸 對(duì)照作用 接種過(guò)程在火焰旁邊進(jìn)行，接種前灼燒接種環(huán)，打開(kāi)試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開(kāi)時(shí)，在酒精燈旁打開(kāi)一個(gè)縫隙等等 定期取樣 50000BC 污染環(huán)境或感染操作者 用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子

【解析】試題閱讀題干和題圖可知，本題是利用微生物培養(yǎng)的知識(shí)分離高效降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物，先分析題圖，了解分離高效降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物的過(guò)程，然后根據(jù)問(wèn)題的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識(shí)點(diǎn)分析解答。其中圖示是稀釋涂布平板法。

（1）經(jīng)過(guò)①→③的重復(fù)培養(yǎng)，目的是增大分解對(duì)羥基苯甲酸的微生物的比例。

（2）振蕩培養(yǎng)的目的之一是增大培養(yǎng)液中溶解氧，對(duì)此可推測(cè)培養(yǎng)微生物的代謝類型是異養(yǎng)需氧型；目的之二是讓目的菌充分利用培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

（3）實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)的微生物主要是能降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物，所以⑤中的菌落中大部分是降解對(duì)羥基苯甲酸微生物；⑥中沒(méi)有對(duì)羥基苯甲酸，⑦中含有對(duì)羥基苯甲酸，所以⑥是起對(duì)照作用，對(duì)照的目的是說(shuō)明通過(guò)選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物。

（4）⑤→⑥過(guò)程中，為了盡可能防止雜菌污染，可以采用接種過(guò)程在火焰旁邊進(jìn)行，接種前灼燒接種環(huán)，打開(kāi)試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開(kāi)時(shí)，在酒精燈旁打開(kāi)一個(gè)縫隙等等。

（5）若研究“目的菌”的群體生長(zhǎng)規(guī)律，將單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，采用定期取樣的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。根據(jù)密度=總數(shù)/體積，所以原菌液的菌群密度為(B/5)×25÷0.1×1000×C=50000BC個(gè)/mL。

（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉，以免污染環(huán)境或感染操作者。滅菌是指用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。