Question

【題目】請(qǐng)回答與“固定化酶”實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問題：

(1)—淀粉酶可以通過培養(yǎng)枯草桿菌來生產(chǎn)，_______是篩選高表達(dá)量菌株的最簡便方法之一。篩選出的菌株在發(fā)酵生產(chǎn)之前還需利用__________培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

(2)利用物理或化學(xué)的方法將—淀粉酶固定后，成為_______且又有酶活性的制劑。若用吸附法固定時(shí)，在裝柱后需要用_________緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液發(fā)生___________為止。

(3)將淀粉溶液以一定流速從反應(yīng)柱上端滴入，再在下端接取少量流出液進(jìn)行KI-I2顏色測(cè)試，結(jié)果不呈現(xiàn)紅色。對(duì)此現(xiàn)象的解釋錯(cuò)誤的是___________

A．反應(yīng)柱中沒有—淀粉酶被固定

B．流速過快淀粉未被水解

C．接取的流出液是蒸餾水

D．流速過慢淀粉被水解成葡萄糖

Answer 1

【答案】 單菌落分離 液體 不溶于水 10倍體積蒸餾水 褪色 D

【解析】試題分析：固定化酶是指用物理學(xué)或化學(xué)的方法將酶與固相載體結(jié)合在一起形成的仍具有酶活性的酶復(fù)合物。在催化反應(yīng)中，它以固相狀態(tài)作用于底物，反應(yīng)完成后，容易與水溶性反應(yīng)物和產(chǎn)物分離，可被反復(fù)使用。

（1）單菌落的分離是篩選高表達(dá)菌株的最簡便方法之一；篩選出的菌株在發(fā)酵生產(chǎn)之前還需利用液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

（2）—淀粉酶在水溶液中很不穩(wěn)定，且不利于工業(yè)化使用，常用固定化技術(shù)使之成為不溶性于水而又有酶活性的制劑。若用吸附法固定時(shí)，在裝柱后需要用蒸餾水緩慢沖洗，所用的蒸餾水體積為裝填體積的10倍，直至流出液不使淀粉-碘混合液發(fā)生褪色為止。

（3）根據(jù)題干信息分析，將淀粉溶液以一定流速從反應(yīng)柱上端滴入，再在下端接取少量流出液進(jìn)行KI-I2顏色測(cè)試，結(jié)果不呈現(xiàn)紅色，說明仍然有淀粉存在，可能是由于反應(yīng)柱中沒有—淀粉酶被固定，導(dǎo)致淀粉沒有被水解，A正確；也可能是流速過快，導(dǎo)致淀粉未被水解，B正確；也可能接取的流出液是蒸餾水，C正確；淀粉溶液經(jīng)過α‐淀粉酶后的水解產(chǎn)物是糊精，不是葡萄糖，D錯(cuò)誤。