Question

【題目】回答下列（一）（二）小題：

（一）柑橘汁在國內(nèi)外市場上是最受人們歡迎的飲料之一。其大致的生產(chǎn)工藝流程如下：柑橘→選果與洗凈→榨汁→過濾→果汁的調(diào)和→脫油和脫氣→加熱殺菌→裝填和冷卻。

（1）為提高柑橘的出汁率，榨汁時一般采用以下兩種處理方式：一是加________處理，分解果肉組織中的果膠物質(zhì)，提高出汁率；二是__________處理，使細(xì)胞原生質(zhì)中的蛋白質(zhì)凝固，改變了細(xì)胞的半透性，從而提高出汁率。

（2）果汁中含有3%～5%的果肉漿能給予果汁良好的色澤和濁度，但過量會使果汁粘稠化。檢測柑橘汁中果肉漿含量是否合格，可采用比濁法，需要先繪制果肉漿含量與光密度值關(guān)系的______________，再通過測定樣品柑橘汁的______________進(jìn)行計算。

（3）工業(yè)生產(chǎn)中的果汁在裝填之前需殺菌處理。柑橘的果汁pH一般都較低，因此殺菌時主要以______為殺菌對象。在微生物的分離、計數(shù)過程中，常采用_____________法接種，計數(shù)過程中統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為____________。

（二）從西非熱帶植物果實中提取的甜味蛋白質(zhì)Brazzein是一種高甜度、低熱值的新型非糖甜味劑。但是由于受到產(chǎn)地種植的限制等，難以實現(xiàn)Brazzein的大量生產(chǎn)。近幾年人們引入生物工程方法獲得甜味蛋白。如圖是科學(xué)家培育能生產(chǎn)甜味蛋白質(zhì)Brazzein乳腺生物反應(yīng)器的過程，請回答相關(guān)問題：

（1）甜味蛋白質(zhì)Brazzein基因，可采用PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴增，但前提是______________。過程①可采用動物病毒轉(zhuǎn)染法，利用攜帶目的基因的病毒感染胚胎干細(xì)胞，實現(xiàn)對胚胎干細(xì)胞的__________。

（2）過程③通常從雌性小鼠的_______________中獲取囊胚。過程④是將胚胎干細(xì)胞顯微注射到小鼠的囊胚腔內(nèi)形成嵌合體囊胚，將不同來源的基因轉(zhuǎn)移、組合到嵌合體中，利用這一種方法可以解決________________的困難。

（3）過程⑤中要對受體小鼠進(jìn)行_____________處理，得到的嵌合體小鼠的毛色為___________________。

（4）鑒定嵌合體小鼠是否成功表達(dá)甜味蛋白質(zhì)Brazzein，可以利用_____________原理對小鼠乳汁中的特異性蛋白進(jìn)行檢測。

Answer 1

【答案】果膠酶 加熱 標(biāo)準(zhǔn)曲線 光密度值（OD值） 霉菌 稀釋涂布 當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 甜味蛋白質(zhì)Brazzein基因序列已知 轉(zhuǎn)化 子宮角或輸卵管 遠(yuǎn)緣雜交不親和 同期發(fā)情 黑白相間 抗原抗體反應(yīng)

【解析】

果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，也是果汁變得澄清；比濁法測定柑橘汁中果肉漿含量的相關(guān)操作可參考泡菜制作過程中亞硝酸鹽的測定；微生物接種常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中用稀釋涂布法可以得到單菌落，因而可以對微生物計數(shù)；培育能生產(chǎn)甜味蛋白質(zhì)Brazzein乳腺生物反應(yīng)器的過程中，甜味蛋白質(zhì)Brazzein基因是目的基因，圖中①表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，早期發(fā)育的胚胎分為卵裂期、桑椹胚、囊胚、原腸胚等階段，③獲取小鼠囊胚可從生殖器官中（輸卵管和子宮角）取出；⑤表示將嵌合體囊胚移植到受體內(nèi)，著床發(fā)育形成個體并表達(dá)的過程。

（一）（1）為提高柑橘的出汁率，榨汁時一般采用以下兩種處理方式：一是加果膠酶處理，二是加熱處理，兩者都能提高出汁率。

（2）果汁中含有3%～5%的果肉漿能給予果汁良好的色澤和濁度，但過量會使果汁粘稠化。檢測柑橘汁中果肉漿含量是否合格，可采用比濁法，需要先繪制果肉漿含量與光密度值關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，再通過測定樣品柑橘汁的光密度值進(jìn)行計算。

（3）柑橘的果汁pH一般都較低，而細(xì)菌通常要求在中性偏堿的環(huán)境中生長，霉菌要求在中性偏酸的環(huán)境中生長，因此工業(yè)生產(chǎn)中的果汁在裝填之前需殺菌處理，此殺菌時主要以霉菌為殺菌對象。微生物的接種、純化可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，計數(shù)時應(yīng)用稀釋涂布法接種，用該方法接種后，培養(yǎng)基上當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此計數(shù)過程中統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。

（二）（1）甜味蛋白質(zhì)Brazzein基因，可采用PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴增，但前提是甜味蛋白質(zhì)Brazzein基因序列已知。過程①可采用動物病毒轉(zhuǎn)染法，利用攜帶目的基因的病毒感染胚胎干細(xì)胞，實現(xiàn)對胚胎干細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。

（2）過程③通常從雌性小鼠的子宮角或輸卵管中獲取囊胚。過程④是將胚胎干細(xì)胞顯微注射到小鼠的囊胚腔內(nèi)形成嵌合體囊胚，將不同來源的基因轉(zhuǎn)移、組合到嵌合體中，利用這一種方法可以解決遠(yuǎn)緣雜交不親和的困難。

（3）過程⑤將囊胚移植前，要對受體小鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，再移植到受體小鼠的子宮內(nèi)；甜味蛋白質(zhì)Brazzein基因來自白色小鼠胚胎干細(xì)胞，囊胚來自黑色小鼠，形成的嵌合體囊胚發(fā)育得到的嵌合體小鼠的毛色理論上為黑白相間。

（4）鑒定嵌合體小鼠是否成功表達(dá)甜味蛋白質(zhì)Brazzein，可以利用抗原-抗體反應(yīng)原理對小鼠乳汁中的特異性蛋白進(jìn)行檢測。