Question

【題目】復(fù)合型免疫缺陷癥（SCID）患者缺失ada基囚．利用基因療法將人正常ada基因轉(zhuǎn)入患者自身T細(xì)胞．可改善患者的免疫功能．如圖顯示該基因療法的兩個(gè)關(guān)鍵步驟．回答下列問(wèn)題：
（1）圖中所示獲取正常ada基因的方法是 ， 若要大量獲取該基因，可通過(guò)PCR技術(shù)迸行擴(kuò)增．與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程相比，PCR技術(shù)的不同點(diǎn)有（答出兩點(diǎn)）
（2）步驟②是 ． 在該步驟中，病毒作為起作用，需使用的工具酶有 ．
（3）完成步驟②后，在體外將人正常ada基因?qū)�入患者自身的T細(xì)胞．此后，在將該T細(xì)胞重新輸入患者體內(nèi)之前，還必須完成哪兩項(xiàng)操作？

Answer 1

【答案】
（1）從基因文庫(kù)中獲取目的基因；不需要解旋酶、需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體；運(yùn)載體；限制酶和DNA連接酶
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)
【解析】解：（1）圖中所示獲取目的基因的方法是從基因文庫(kù)中獲取目的基因；與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程相比，PCR技術(shù)的不同點(diǎn)有：不需要解旋酶、需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶．（2）步驟②是構(gòu)建基因表達(dá)載體．在該步驟中，病毒作為運(yùn)載體起作用；構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要限制酶切割運(yùn)載體和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA分子．（3）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．因此完成步驟②后，在體外將人正常ada基因?qū)�入患者自身的T細(xì)胞．此后，在將該T細(xì)胞重新輸入患者體內(nèi)之前，還必須完成的兩項(xiàng)操作為：將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)． 所以答案是：（1）從基因文庫(kù)中獲取目的基因 不需要解旋酶、需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體 運(yùn)載體 限制酶和DNA連接酶（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)
【考點(diǎn)精析】認(rèn)真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(shù)(基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù))．