Question

【題目】溶藻細(xì)菌對(duì)控制水華有非常重要的作用。研究人員從池塘中采集水樣，加人到無菌錐形瓶中，用搖床在37℃下振蕩培養(yǎng)20 min，使其均勻分散成菌懸液，再通過分離、純化、鑒定得到了溶藻細(xì)菌。請(qǐng)回答下列問題：

（1）分離前需用無菌移液管從菌懸液中吸取菌液1mL，進(jìn)行梯度稀釋，其目的是___________。再取每個(gè)稀釋度的菌懸液0.1mL用___________法接種到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上，每個(gè)梯度做三組，37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直至長出菌落。

（2）若將1mL菌懸液梯度稀釋106倍，再取0.1mL接種到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上，分別形成了260、280、270個(gè)菌落，則原菌懸液中每毫升有細(xì)菌___________個(gè)，該方法所得測(cè)量值一般比實(shí)際值偏___________，原因是_________________________________。

（3）水華為藍(lán)藻暴發(fā)所致。研究人員嘗試?yán)�用溶藻�?xì)菌限制藍(lán)藻數(shù)量，相關(guān)實(shí)驗(yàn)如圖所示（圖中①⑥表 示實(shí)驗(yàn)步驟）。

如果在步驟⑤實(shí)驗(yàn)組的每個(gè)培養(yǎng)皿中做三個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，可采取的做法是：_______________。為完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，應(yīng)增設(shè)對(duì)照組，可采取的做法是：_________________________________。藍(lán)藻通常呈藍(lán)綠色，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)褪色空斑，說明藍(lán)藻_________________________________。

Answer 1

【答案】使水樣中的各種微生物細(xì)胞分散開來稀釋涂布平板2.7×109 低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落在每個(gè)培養(yǎng)皿中，選擇三個(gè)不同位置，各滴加等量菌液在對(duì)照組的每個(gè)培養(yǎng)皿中，選擇三個(gè)不同位置，各滴加等量的、不含溶藻細(xì)菌的細(xì)菌培養(yǎng)液被溶藻細(xì)菌裂解（死亡）

【解析】

由題文描述可知：該題綜合考查學(xué)生對(duì)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與計(jì)數(shù)等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)的識(shí)記和理解能力，以及能對(duì)一些簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂能力。

(1)為了使水樣中的各種微生物細(xì)胞分散開來，分離前需用無菌移液管從菌懸液中吸取菌液1mL，進(jìn)行梯度稀釋。然后采用稀釋涂布平板法，將其接種到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上。

(2)若將1mL菌懸液梯度稀釋106倍，再取0.1mL接種到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上，分別形成了260、280、270個(gè)菌落，則原菌懸液中每毫升有細(xì)菌的個(gè)數(shù)＝（260＋280＋270）÷3÷0.1×106＝2.7×109個(gè)。由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以該方法所得測(cè)量值一般比實(shí)際值偏低。

(3) 本實(shí)驗(yàn)的目的是探究溶藻細(xì)菌對(duì)藍(lán)藻數(shù)量的影響，自變量是溶藻細(xì)菌的有無。依據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循的對(duì)照原則、等量原則、重復(fù)原則并結(jié)合題意“在每個(gè)培養(yǎng)皿中做三個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)”可知，為了能夠達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康模瑢?shí)驗(yàn)組的設(shè)置是在每個(gè)培養(yǎng)皿中，選擇三個(gè)不同位置、各滴加等量菌液，而對(duì)照組的設(shè)置則是在每個(gè)培養(yǎng)皿中，選擇三個(gè)不同位置，各滴加等量的、不含溶藻細(xì)菌的細(xì)菌培養(yǎng)液。由圖示信息可知：先單獨(dú)光照培養(yǎng)藍(lán)藻，在培養(yǎng)皿中先形成藍(lán)綠色菌斑；后加入溶藻細(xì)菌培養(yǎng)液。由于溶藻細(xì)菌可將藍(lán)綠色菌斑里的藍(lán)藻分解，導(dǎo)致藍(lán)藻裂解死亡，所以最終使藍(lán)綠色菌斑褪色成為空斑。可見，如果培養(yǎng)皿中出現(xiàn)褪色空斑，說明藍(lán)藻被溶藻細(xì)菌裂解死亡。