Question

【題目】Rag2基因（核基因重組激活基因）缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞，從而導致先天性免疫缺陷．科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行如下圖所示的基因治療．其技術流程如圖：

（1）動物細胞培養(yǎng)時培養(yǎng)箱中常加入95%和5%的CO2 ， CO2的主要作用是 ． 培養(yǎng)過程中應定期更換培養(yǎng)液，以便 ， 防止其積累對細胞造成危害．
（2）進行核移植的供體細胞一般用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞，其原因是10代以內(nèi)的細胞 ．
（3）進行步驟①時，卵母細胞需發(fā)育到期；步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到期時，可從其分離出ES細胞，在此之后的發(fā)育過程中，還可以從中分離出ES細胞．
（4）選用Rag2基因缺失小鼠自身的體細胞經(jīng)過如上圖流程獲得的造血干細胞對小鼠進行治療，其好處是可以避免 ．

Answer 1

【答案】
（1）維持培養(yǎng)液的pH；去除代謝產(chǎn)物
（2）能保持正常的二倍體核型
（3）MⅡ中；囊胚；內(nèi)細胞團；原始性腺
（4）免疫排斥反應
【解析】解：（1.）動物細胞培養(yǎng)時培養(yǎng)箱中常加入95%和5%的CO2 ， CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．培養(yǎng)過程中應定期更換培養(yǎng)液，以便去除代謝產(chǎn)物，防止其積累對細胞造成危害．
（2.）進行核移植的供體細胞一般用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞，其原因是10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型．
（3.）進行步驟①時，卵母細胞需發(fā)育到MⅡ中期；步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其內(nèi)細胞團分離出ES細胞，在此之后的發(fā)育過程中，還可以從原始性腺中分離出ES細胞．
（4.）選用Rag2基因缺失小鼠自身的體細胞經(jīng)過如上圖流程獲得的造血干細胞對小鼠進行治療，其好處是可以避免免疫排斥反應．
【考點精析】根據(jù)題目的已知條件，利用動物細胞與組織培養(yǎng)過程的相關知識可以得到問題的答案，需要掌握取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．