【題目】在含有X-gal和IPTG物質(zhì)的培養(yǎng)基上,大腸桿菌質(zhì)粒上的lacZ基因如表達出產(chǎn)物β-半乳糖苷酶,則能使菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落呈現(xiàn)白色;蚬こ讨谐@迷撛韽膶(dǎo)入質(zhì)粒的受體細胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細胞。請據(jù)圖回答:

(1)限制酶EcoRI的識別序列和酶切位點是-G↓,AATTC-,SmaI的識別序列和酶切位點是-CCC↓GGG-,圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端,連接的末端序列是______________。限制酶EcoRI在質(zhì)粒上的酶切位點在lacZ基因中,故該基因工程中,lacZ基因的作用為_____________基因。

(2)獲取目的基因后,常利用__________技術(shù)在體外將其大量擴增,此過程需要一種特殊的酶叫______。

(3)轉(zhuǎn)化過程中,大腸桿菌應(yīng)先用_____________處理,使其成為_________________細胞。

(4)顏色為白色的是含有目的基因的菌落,原因是____________。

【答案】 -TTAA 標(biāo)記 PCR Taq酶(或“耐高溫的DNA聚合酶”) Ca2+(或CaCl2溶液) 感受態(tài) lacZ標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞,不能表達出β-半乳糖苷酶,故菌落為白色

【解析】分析:目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識別序列,右側(cè)是限制酶SmaI的識別序列,而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識別序列,所以需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒,用限制酶EcoRI和SmaI來切割含有目的基因的外源DNA分子,這樣就使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接,所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA。用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時,會破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因,但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后,lacZ'基因又被修復(fù),能表達產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以產(chǎn)生藍色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍色,所以菌落①②呈現(xiàn)藍色;菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒,其lacZ'基因被破壞,不能表達產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落顏色為白色。

(1)由圖可知,目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識別序列,右側(cè)是限制酶Sma I的識別序列,而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識別序列,所以需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒,用限制酶EcoRI和Sma I來切割含有目的基因的外源DNA分子,這樣就使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接,所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA。lacZ基因的作用為標(biāo)記基因用于目的基因的鑒定和篩選。

(2)獲取目的基因后,常利用PCR技術(shù)在體外將其大量擴增,此過程需要一種特殊的酶叫Taq酶(或“耐高溫的DNA聚合酶”)。

(3)轉(zhuǎn)化過程中,大腸桿菌應(yīng)先用Ca2+(或CaCl2溶液)處理,使其成為感受態(tài)細胞。

(4)lacZ標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞,不能表達出β-半乳糖苷酶,故含有目的基因的菌落為白色。

練習(xí)冊系列答案
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【題目】下列一組細胞器中,具有雙層膜的是(
A.線粒體和葉綠體
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【題目】下圖是由藍藻、綠藻(如小球藻)等大量繁殖后發(fā)生水華現(xiàn)象的某湖泊生態(tài)系統(tǒng)的碳循環(huán)過程,圖中箭頭表示碳流動的方向。請據(jù)圖回答:

(1)藍藻與小球藻在細胞結(jié)構(gòu)占的主要區(qū)別是__________________________。

(2)從生態(tài)系統(tǒng)的組成成分看,圖中_____________可表示藍藻、綠藻等,D表示_____________

(3)碳元素在A、B、C之間以_____________形式傳遞。

(4)完成⑤過程的生理活動主要是_____________。

(5)若在該湖泊生態(tài)系統(tǒng)中,C能量的1/4直接提供給B,則要使B能量增加8kJ,至少需要消耗C的能量是_____________kJ。

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【題目】某植物夜間通過氣孔吸收C02,并把C02經(jīng)一系列反應(yīng)合成蘋果酸,儲存在液泡中,白天液泡中的蘋果酸可以運送至細胞質(zhì)基質(zhì),經(jīng)過反應(yīng)產(chǎn)生C02,進而參與卡爾文循環(huán)(如圖所示)。請據(jù)圖回答:

(1)葉綠體中的色素主要吸收_____________光和_____________光。

(2)該植物細胞進行卡爾文循環(huán)的場所是葉綠體__________。參與卡爾文循環(huán)的CO2直接來源于_________過程和_____________過程,被固定后生成的化合物是_____________(填“C3”或 “C5”)

(3)經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),該植物夜晚雖然能吸收C02,卻不能合成(CH20),原因是______________________

(4)在電子顯微鏡下觀察,可看到葉綠體內(nèi)部有一些顆粒,它們被看作是葉綠體的“脂質(zhì)倉庫”,其體積隨葉綠體的生長而逐漸變小,可能的原因是_______________________________________。

(5)根據(jù)題干信息可以推測,該植物很有可能生活在_____________(填“干熱”或“濕冷”)的環(huán)填中。

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【題目】下列關(guān)于物質(zhì)運輸?shù)臄⑹,正確的是(
A.物質(zhì)運輸速度受載體影響的為協(xié)助擴散
B.植物細胞質(zhì)壁分離時,水的移動需要消耗能量
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D.某物質(zhì)進入細胞時消耗能量,則該運輸方式為主動運輸

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【題目】下列四組生物中,都屬于原核生物的一組是(
A.病毒和青霉菌
B.破傷風(fēng)桿菌和藍藻
C.衣藻和變形蟲
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A. 第一次觀察時容易看到紫色大液泡和較大的無色細胞質(zhì)基質(zhì)區(qū)域

B. 第二次觀察時可以發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)壁分離首先發(fā)生在細胞的角隅處

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