Question

【題目】下圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程。請(qǐng)回答下列問題：

(1)過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點(diǎn)是_____________________。

(2)過程②中首先需要處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)人大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過程稱為____________________________________。

(3)與植物原生質(zhì)體融合相比，過程④特有的方法是用_____________處理。通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是____________________________。制備單克隆抗體時(shí)，先用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，獲得____________________________，該細(xì)胞的特點(diǎn)是__________________________________________。選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體___________(填“是”或“不是”)單克隆抗體。然后對(duì)上述細(xì)胞進(jìn)行抗體檢測(cè)，選取____________________________的細(xì)胞克隆化培養(yǎng)。

(4)圖示過程應(yīng)用的生物技術(shù)有_____________________________。(至少答出兩種)

Answer 1

【答案】防止目的基因自身環(huán)化，防止目的基因與載體反向連接 轉(zhuǎn)化 滅活的病毒 防止培養(yǎng)過程中的雜菌污染 雜交瘤細(xì)胞 既能分泌專一的抗體、又能無限增殖 不是 能產(chǎn)生特定抗體(或能產(chǎn)生抗埃博拉病毒VP40抗體) 基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合

【解析】

制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程，①是目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③過程表示給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產(chǎn)生特定B淋巴細(xì)胞，④過程是動(dòng)物細(xì)胞融合過程，據(jù)此答題即可。

(1) 過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割可以使目的基因的兩端獲得不同的粘性末端，所以這樣處理的優(yōu)點(diǎn)是防止目的基因環(huán)化。

(2) 過程②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，此過程首先需要用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化。

(3) 與植物原生質(zhì)體融合相比遠(yuǎn)離基本相同，植物原生質(zhì)體融合常用物理方法和化學(xué)方法，動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇和滅活病毒及電激，所以過程④特有的方法是用滅活的病毒處理．通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是防止培養(yǎng)過程中的污染．選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)過多次篩選才可以獲得．所以選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體。

(4) 圖示過程應(yīng)用的生物技術(shù)有：①是目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③過程表示給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產(chǎn)生特定B淋巴細(xì)胞，④過程是動(dòng)物細(xì)胞融合過程。