【題目】Ⅰ.細菌常被應用于生產(chǎn)生活中,如有些細菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的細菌。

(1)在篩選過程中,應將土壤樣品稀釋液接種于以 ________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。為篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍清晰區(qū)域的大小。一般情況下,如圖中清晰區(qū)域越大說明 ____________。

Ⅱ.另一同學將第一步篩選得到的甲、乙、丙三種細菌分別接種到A、B、C三種培養(yǎng)液中,經(jīng)培養(yǎng)后分別測得它們繁殖一代所需的時間,結果如表所示:

培養(yǎng)液成分

繁殖一代所需的時間(分鐘)

A.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4

43

100

B.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4、8種氨基酸

28

40

C.葡萄糖、NaCl、PO、MgSO4、19種氨基酸

25

25

80

注:“-”表示細菌沒有生長。

(2)在A培養(yǎng)基中增殖較快的細菌是____________。丙細菌可以在C培養(yǎng)液中繁殖卻無法在B培養(yǎng)液中繁殖,原因是 ___________。

(3)由于微生物的營養(yǎng)類型復雜,不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不同的。如果培養(yǎng)能進行光合作用的微生物,培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)是 ________(多選題)。

A.碳源     B.氮源      C.生長因子  D.無機鹽     E.水

Ⅲ.下面是有關某細菌G的四項實驗:

實驗1:將G接種于一般培養(yǎng)基上,結果出現(xiàn)菌落。

實驗2:用一定劑量的紫外線處理G,產(chǎn)生突變種g1。將g1接種于一般培養(yǎng)基后,不出現(xiàn)菌落;但在培養(yǎng)基內(nèi)添加營養(yǎng)物質(zhì)甲后,就出現(xiàn)菌落。

實驗3:用另一劑量的紫外線處理G,得突變種g2,將g2接種于一般培養(yǎng)基后,也不出現(xiàn)菌落;但在培養(yǎng)基內(nèi)添加營養(yǎng)物質(zhì)乙后,就出現(xiàn)菌落。

實驗4:將g1和g2一起接種于一般培養(yǎng)基上,數(shù)日后出現(xiàn)菌落。

(4)細菌g1和g2分別接種于一般培養(yǎng)基,均不能生長。其原因是用紫外線處理導致細菌G發(fā)生了 ________,從而缺乏合成營養(yǎng)物質(zhì)甲或乙的酶。

A.基因突變     B.基因重組     C.染色體畸變     D.不可遺傳變異

(5)實驗1至3表明,物質(zhì)甲和乙均是細菌G在代謝過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。在實驗2和3中,它們是作為 ________加入一般培養(yǎng)基的。

A.碳源 B.氮源 C.生長因子 D.無機鹽

(6)實驗4中出現(xiàn)菌落的原因可能是 _____________________。

【答案】 原油 該菌株的降解能力強 B培養(yǎng)液中缺乏丙細菌生長所必需的氨基酸 B、D、E A C 細菌g1能夠合成營養(yǎng)物質(zhì)乙細菌g2能夠合成營養(yǎng)物質(zhì)甲,因此一起培養(yǎng)可以互相支持保證必需的營養(yǎng)要素

【解析】試題分析:該實驗的目的是“從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的細菌”,則應利用選擇培養(yǎng)基,以原油為唯一碳源,比較單菌落周圍清晰區(qū)域的大小,清晰區(qū)域越大說明該菌株的降解能力強。丙植株不能在A、B不能生長繁殖,說明A、B培養(yǎng)基上缺少其生長所需的物質(zhì)。

(1)該實驗目的是從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的細菌,說明該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)基的成分應以原油為唯一碳源分解能力越強,則在培養(yǎng)基上形成的清晰區(qū)域越大。(2)由表格可知,在A培養(yǎng)基中能生長的細菌是甲和乙,甲繁殖一代需要的時間短,所以增殖較快,比較C培養(yǎng)基的成分可知,C培養(yǎng)基的氨基酸的種類比B培養(yǎng)基多,所以丙細菌可以在C培養(yǎng)液中繁殖卻無法在B培養(yǎng)液中繁殖,原因可能是B培養(yǎng)液中缺乏丙細菌生長所必需的氨基酸。(3)光合作用是指利用CO2和H2O合成有機物,所以培養(yǎng)能進行光合作用的微生物,培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)中不需要添加碳源、生長因子和水。(4)細菌屬于原核生物,無染色體,不能進行減數(shù)分裂,所以只能發(fā)生基因突變,突變后的g1不能合成甲物質(zhì),突變后的g2不能合成乙物質(zhì),所以細菌g1和g2分別接種于一般培養(yǎng)基,均不能生長,其原因是用紫外線處理導致細菌G發(fā)生了基因突變,從而缺乏合成營養(yǎng)物質(zhì)甲或乙的酶。(5)實驗1至3表明,物質(zhì)甲和乙均是細菌G在代謝過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,在實驗2和3中,它們是作為生長因子加入一般培養(yǎng)基的。(6)實驗4中出現(xiàn)菌落的原因可能是細菌g1能夠合成營養(yǎng)物質(zhì)乙,g2能夠合成營養(yǎng)物質(zhì)甲,因此一起培養(yǎng)可以互相支持保證必須的營養(yǎng)要素。

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C圖丙中兩圓圈內(nèi)所示的是同一種物質(zhì)

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1)圖1中所示通過①②③過程獲取目的基因的方法為______________________。

2)能否在該哺乳動物的唾液腺細胞中獲得相關的mRNA,為什么?______________

3)將經(jīng)轉基因技術處理過的質(zhì)粒導入大腸桿菌后,再將大腸桿菌接種到含有Xgal底物的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間后,培養(yǎng)基中出現(xiàn)較多的藍色菌落,這是因為__________________。

4)應選用的限制性內(nèi)切酶是____________,選擇的依據(jù)是____________。

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