Question

(7分)某研究性學習小組利用熒光素－熒光素酶生物發(fā)光法，測定人參愈傷組織中ATP的含量，以研究人參細胞能量代謝的特點。

實驗原理：熒光素在熒光素酶、ATP等物質(zhì)參與下，進行反應發(fā)出熒光；用分光光度計可測定發(fā)光強度；當熒光素和熒光素酶都足量時，在一定范圍內(nèi)，ATP的含量與發(fā)光強度成正比。

實驗步驟：

一、ATP的提取：稱取一定量的人參愈傷組織，研磨后沸水浴10 min，冷卻至室溫，離心，取上清液。

二、ATP的測定：吸收一定量的上清液，放入分光光度計反應室內(nèi)，并注入適量的所需物質(zhì)，在有氧等適宜條件下進行反應，記錄發(fā)光強度并計算ATP含量。

請回答：

(1)步驟一中的沸水浴處理，使酶的________被破壞而失活。

(2)步驟二注入的物質(zhì)中，屬于反應物的是________；分光光度計反應室內(nèi)能量形式的轉(zhuǎn)換是________________________________________________________________________。

(3)熒光素酶價格昂貴，為能準確測定出ATP的含量，又能節(jié)省酶的用量，學習小組探究了“測定ATP時所需熒光素酶溶液的最佳濃度”，實驗結(jié)果如下圖。

①學習小組配制了1×10^－8mol/L ATP標準液、70 mg/L熒光素溶液(過量)和______________________溶液進行實驗。

②結(jié)果表明：圖中________點所對應的熒光素酶濃度為最佳濃度。e、f、g點所對應的熒光素酶濃度不同，但發(fā)光強度相同，這是因為________。

(4)ATP測定對食品衛(wèi)生監(jiān)控有重要意義。食品衛(wèi)生檢驗人員利用上述生物發(fā)光法測定某熟食樣品中細菌的ATP總含量，測算出了細菌的數(shù)量，從而判斷食品污染程度。做出上述判斷的理由是：每個細菌細胞中ATP的含量________。

 

Answer 1

【答案】

（1）空間結(jié)構(gòu)（2）熒光素  化學能轉(zhuǎn)化為光能（熱能）（3）①濃度分別為0、10、20、30、40、50、60mg/L熒光素酶 ② e  ATP全部水解（或ATP數(shù)量限制）（4）大致相同（且相對穩(wěn)定）

【解析】

試題分析：(1)沸水浴會破壞酶的空間結(jié)構(gòu)，酶的活性喪失。（2）由實驗原理可知，反應物為熒光素；利用ATP使熒光素發(fā)出熒光，使ATP中的化學能轉(zhuǎn)變?yōu)闊晒獾墓饽�。�?）①由題意，還需要配置熒光素酶，由上圖可知，橫坐標為濃度梯度應分別為0、10、20、30、40、50、60mg/L。②發(fā)光強度剛達到最強的點對應的濃度是熒光素酶最佳濃度，為e點；ATP數(shù)量一定，當酶濃度超過最佳濃度后，由于ATP數(shù)量有限，發(fā)光強度將維持一定強度不再變化。（4）ATP與ADP的含量在人體內(nèi)處于動態(tài)平衡，同種生物體內(nèi)ATP很少，含量相對穩(wěn)定。

考點：本題考查ATP的相關(guān)知識，意在考查考生能理解實驗目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。