Question

【題目】枯草桿菌廣泛分布于士壤及腐敗的有機物中，某工廠為生產(chǎn)耐高溫的淀粉酶，開展了枯草桿菌菌株的篩選、酶的固定化分析研究，其流程如圖所示：

（1）配制培養(yǎng)基：該培養(yǎng)基應(yīng)以____________為唯一碳源。

（2）取土樣加入盛有無菌水的三角瓶中，常壓加熱至水沸騰后維持20分鐘，其目的是____________。取出三角瓶置于37℃條件下培養(yǎng)24小時，液面產(chǎn)生黃白色皮膜，用接種環(huán)挑取菌膜，用_______法接種到平板上，于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24小時，取出觀察，若淀粉被水解，菌落周圍會產(chǎn)生_______，選擇優(yōu)良的菌株進行擴大培養(yǎng)。

（3）在建立和優(yōu)化淀粉酶固定化酶柱連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中，通常要分析汁液中各種成分的濃度和所用酶的活性，然后主要優(yōu)化各固定化酶反應(yīng)器中的_________（答出2點即可）、反應(yīng)pH和酶反應(yīng)時間等因素。其中，酶反應(yīng)時間可通過_______來調(diào)節(jié)。

（4）工業(yè)生產(chǎn)中，對淀粉酶需求量很大，目前較好的解決辦法是將淀粉酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，具體是以海藻酸鈉為“網(wǎng)格”載體，戊二醛為交聯(lián)劑，即采用______和交聯(lián)法兩種方法將酶固定化，以實現(xiàn)____________，從而減少對淀粉酶的需求。

Answer 1

【答案】淀粉 篩選出耐高溫菌株 平板劃線 透明圈 固定化酶的量、反應(yīng)液溫度 控制反應(yīng)器液體流速 包埋 重復(fù)利用

【解析】

微生物常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。固定化酶和固定化細(xì)胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法。

（1）由題“生產(chǎn)耐高溫的淀粉酶”可知，該培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉為唯一碳源。

（2）因篩選的是耐高溫的淀粉酶，土壤加入無菌水后加熱至水沸騰維持20分鐘以篩選出耐高溫菌株。篩選菌株用平板劃線法接種，恒溫培養(yǎng)后觀察，菌落周圍產(chǎn)生透明圈，說明淀粉酶被水解。

（3）影響酶活性的因素有溫度、pH和酶濃度等，在建立和優(yōu)化淀粉酶固定化酶柱連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中，主要優(yōu)化各固定化酶反應(yīng)器中的固定化酶的量、反應(yīng)液溫度、反應(yīng)pH和酶反應(yīng)時間等因素。酶反應(yīng)時間可通過控制反應(yīng)器液體流速調(diào)節(jié)。

（4）以海藻酸鈉為“網(wǎng)格”載體為包埋法，可以實現(xiàn)酶的重復(fù)利用，從而減少對淀粉酶的需求。