Question

【題目】萘乙酸作為植物生長調(diào)節(jié)劑，已證實(shí)對(duì)人體有一定毒害作用，且隨其濃度增加毒害作用增強(qiáng)。以小鼠肝臟毒理實(shí)驗(yàn)為依托，研究不同濃度的萘乙酸對(duì)小鼠肝細(xì)胞增殖活性的影響。請(qǐng)利用以下材料與用具，完善實(shí)驗(yàn)思路，預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并進(jìn)行分析討論。

實(shí)驗(yàn)材料與用具：健康小鼠若干（雌、雄各半）、普通飼料、萘乙酸、手術(shù)用具等。

（說明：細(xì)胞增殖活性是反映細(xì)胞生命力強(qiáng)弱的重要指標(biāo)，當(dāng)細(xì)胞受到異常的環(huán)境因素?fù)p傷時(shí)，首先表現(xiàn)為增殖活性的降低�，F(xiàn)采用MTT法測(cè)定細(xì)胞懸液吸光度表示小鼠肝細(xì)胞增殖活性，在適宜范圍內(nèi)，細(xì)胞增殖活性越大，細(xì)胞懸浮液吸光度越高。用MTT法測(cè)定吸光度的具體過程不作要求。）

（1）實(shí)驗(yàn)思路：

①將5000 mg／kg、1000 mg／kg、200 mg／kg萘乙酸分別與普通飼料混合，制成高、中、低劑量的萘乙酸染毒飼料。

②將健康小鼠隨機(jī)平均分為4組，每組雌雄各半，分籠飼養(yǎng)，編號(hào)A、B、C、D組。

③A、B、C組每天分別飼喂_________，D組飼喂_________。

④各組在相同且適宜條件下飼養(yǎng)28天后，取出各組小鼠肝臟，制備小鼠肝細(xì)胞懸液，用MTT法測(cè)得_________。

⑤對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（以柱形圖形式表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果）_______

（3）討論和

①除上述方法外，還可以利用_________直接進(jìn)行細(xì)胞數(shù)目統(tǒng)計(jì)，用于表示萘乙酸對(duì)小鼠肝細(xì)胞增殖活性的影響；計(jì)數(shù)過程中壓在方格上的細(xì)胞只計(jì)左線和上線上的細(xì)胞數(shù)的目的是_______。

②進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)萘乙酸對(duì)小鼠肝細(xì)胞具有致畸作用，實(shí)驗(yàn)中常借助顯微鏡能觀察到的細(xì)胞變異類型是________，通常選擇__（填時(shí)期）的細(xì)胞進(jìn)行觀察。

Answer 1

【答案】適量且等量的高、中、低劑量的萘乙酸染毒飼料 等量的普通飼料 小鼠肝臟細(xì)胞增殖活性并記錄數(shù)據(jù) 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 避免重復(fù)計(jì)數(shù)，減少誤差 染色體畸變 有絲分裂中期

【解析】

據(jù)題文的描述可知：該題以“研究不同濃度的萘乙酸對(duì)小鼠肝細(xì)胞增殖活性的影響”為情境，考查學(xué)生對(duì)染色體變異、萘乙酸的作用、探究酵母菌種群數(shù)量的變化等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力，以及具有對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力。

(1) 依題意可知，本實(shí)驗(yàn)的目的是研究不同濃度的萘乙酸對(duì)小鼠肝細(xì)胞增殖活性的影響，自變量是萘乙酸濃度的不同，因變量是小鼠肝細(xì)胞增殖活性，該增殖活性可通過用MTT法測(cè)定小鼠肝臟細(xì)胞懸液的吸光度來加以體現(xiàn)，而其它對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響的因素均為無關(guān)變量，應(yīng)控制相同且適宜。依據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循的原則、已經(jīng)給出的不完整的實(shí)驗(yàn)步驟可推知：實(shí)驗(yàn)思路③中的A、B、C組為實(shí)驗(yàn)組，每天應(yīng)分別飼喂適量且等量的高、中、低劑量的萘乙酸染毒飼料，D組為對(duì)照組，應(yīng)每天飼喂等量的普通飼料；④中需用MTT法測(cè)得小鼠肝臟細(xì)胞懸液的吸光度并記錄數(shù)據(jù)。

(2) 已知萘乙酸對(duì)人體的毒害作用隨其濃度的增加而增強(qiáng)，據(jù)此結(jié)合實(shí)驗(yàn)思路可推知：該實(shí)驗(yàn)結(jié)果為A、B、C、D組的小鼠肝臟細(xì)胞增殖活性依次增強(qiáng)，因此用MTT法測(cè)定的小鼠肝臟細(xì)胞懸液的吸光度也依次增大。在畫出反映實(shí)驗(yàn)結(jié)果的柱形圖時(shí)，要注意橫坐標(biāo)標(biāo)明組別，縱坐標(biāo)標(biāo)明細(xì)胞懸液吸光度，用以表示各組別吸光度的柱形圖的寬度要相等，但長度不等。反映實(shí)驗(yàn)結(jié)果的柱形圖見答案。

(3) ①在研究萘乙酸對(duì)小鼠肝細(xì)胞增殖活性的影響時(shí)，還可以利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接進(jìn)行細(xì)胞數(shù)目統(tǒng)計(jì)。計(jì)數(shù)過程中壓在方格上的細(xì)胞只計(jì)左線和上線上的細(xì)胞數(shù)，其目的是避免重復(fù)計(jì)數(shù)，減少誤差。

②在研究萘乙酸對(duì)小鼠肝細(xì)胞具有致畸作用的實(shí)驗(yàn)中，肝細(xì)胞產(chǎn)生的可遺傳變異，只有染色體畸變可以借助顯微鏡能觀察到。因肝細(xì)胞是通過有絲分裂進(jìn)行增殖的，而處于有絲分裂中期的細(xì)胞內(nèi)，染色體的形態(tài)比較穩(wěn)定，數(shù)目比較清晰，是觀察辨認(rèn)染色體的最佳時(shí)期，所以通常選擇有絲分裂中期的細(xì)胞進(jìn)行觀察。