【題目】下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn),其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用___________________________兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過(guò)_____________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入處于_____________態(tài)的大腸桿菌。
(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加_____________,平板上長(zhǎng)出的菌落,常用PCR鑒定,所用的引物組成為圖2中_____________________________。
(3)若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接,連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為___________________________,對(duì)于該部位,這兩種酶_____________(填“都能”、“都不能”或“只有一種能”)切開(kāi)。
(4)若用Sau3AI切圖1質(zhì)粒最多可能獲得_______________種大小不同的DNA片段。
【答案】BclⅠ和HindⅢ DNA連接 感受態(tài) 四環(huán)素 引物甲和引物丙 都不能 7
【解析】
根據(jù)表格中限制酶的識(shí)別序列的特點(diǎn)可知,BamHI酶、BclI酶和Sau3AI酶切割后的黏性末端相同,故用不同限制酶切割后的黏性末端可能連接在一起。
(1)由圖1可知,BamHI酶在質(zhì)粒上面有兩個(gè)酶切位點(diǎn),作用后會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因以及氨芐青霉素抗性基因,而且會(huì)將質(zhì)粒水解成兩個(gè)片段,再與目的基因連接時(shí)容易發(fā)生自身環(huán)化或產(chǎn)生無(wú)標(biāo)記基因的重組質(zhì)粒,為保證質(zhì)粒上仍然保留標(biāo)記基因,應(yīng)選用限制酶為BclⅠ和HindⅢ。酶切后的載體和目的基因片段,通過(guò)DNA連接酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入用鈣離子處理的處于感受態(tài)的大腸桿菌內(nèi)。
(2)由于重組質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因未被破壞,故為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加四環(huán)素,若平板上長(zhǎng)出了菌落,說(shuō)明轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒。由圖中引物延伸的方向,可知PCR復(fù)制目的基因時(shí)應(yīng)選用的引物為引物甲和引物丙。
(3)根據(jù)圖示中限制酶的酶切后的黏性末端可知,若BamH I酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接,連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為。所形成的新的序列不能被上述兩種限制酶識(shí)別,故對(duì)于該部位,這兩種酶都不能切開(kāi)。
(4)由表中酶切位點(diǎn)可知,BamHI和BclI識(shí)別的序列中都含有Sau3AI的識(shí)別序列和切點(diǎn),圖1中有2個(gè)BamHI的酶切位點(diǎn)、1個(gè)BclI的酶切位點(diǎn),所以Sau3AI在質(zhì)粒上有3個(gè)酶切位點(diǎn)。若只有一個(gè)Sau3AI切開(kāi)一個(gè)位點(diǎn),得到一條最長(zhǎng)的線性DNA分子,若有兩個(gè)Sau3AI同時(shí)切開(kāi)兩個(gè)位點(diǎn),則會(huì)形成6種不同長(zhǎng)度的DNA片段,若三個(gè)酶切位點(diǎn)同時(shí)切開(kāi),則形成的三個(gè)長(zhǎng)度的片段與前面重復(fù),故若用Sau3AI切圖1質(zhì)粒最多可能獲得7種大小不同的DNA片段。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】胰島素分子有A、B兩條肽鏈,A鏈有21個(gè)氨基酸,B鏈有30個(gè)氨基酸,胰島素分子中肽鍵的數(shù)目是( )
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【題目】某農(nóng)場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)了一批生根粉準(zhǔn)備用于某植物的批量扦插,說(shuō)明書(shū)上沒(méi)有注明該植物適宜的使用濃度,正確的使用措施是
A.用高濃度,以保證生根
B.用低濃度,以降低成本
C.任選一種濃度進(jìn)行扦插
D.用不同濃度的生根粉進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)
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【題目】下圖是某處沙丘發(fā)生自然演替過(guò)程中的三個(gè)階段,下列敘述正確的是
A. 從形成沙丘開(kāi)始發(fā)生的演替是次生演替
B. 階段Ⅰ的沙丘上草本植物占優(yōu)勢(shì),群落尚未形成垂直結(jié)構(gòu)
C. 階段Ⅰ與階段Ⅱ的沙丘上生長(zhǎng)的植物種類(lèi)完全不同
D. 階段Ⅲ沙丘上的群落對(duì)外界干擾的抵抗力穩(wěn)定性最強(qiáng)
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A. ①×④ B. ①×② C. ②×③ D. ②×④
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【題目】用生長(zhǎng)素類(lèi)似物處理插條的方法很多,其中以浸泡法和沾蘸法較為簡(jiǎn)便。下列有關(guān)這兩種方法的敘述,錯(cuò)誤的是
A.插條用沾蘸法處理的時(shí)間比浸泡法的短
B.插條用沾蘸法處理的溶液的濃度比浸泡法的低
C.插條用浸泡法處理,其在溶液中的深度約為3 cm
D.插條用沾蘸法處理,其在溶液中的深度約為1.5 cm
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【題目】從某動(dòng)物的消化腺細(xì)胞中獲得三種細(xì)胞器,測(cè)定他們有機(jī)物的含量如下圖,有關(guān)說(shuō)法正確的是()
A. 葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞器甲徹底分解產(chǎn)生二氧化碳和水
B. 細(xì)胞器乙具有膜結(jié)構(gòu),肯定與分泌蛋白的加工和分泌有關(guān)
C. 細(xì)胞器丙進(jìn)行的生理過(guò)程產(chǎn)生的水中的氫來(lái)自于羧基和氨基
D. 念珠藻細(xì)胞與此細(xì)胞共有的細(xì)胞器可能有甲和丙
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