【題目】多氯聯(lián)苯是一種對(duì)人體有很大危害的有機(jī)物質(zhì),污染土壤后,很難清除。研究發(fā)現(xiàn),部分酵母菌具有分解多氯聯(lián)苯的作用。為消除這種污染,科研人員計(jì)劃從污染的土壤中篩選出高效分解多氯聯(lián)苯的菌株。請(qǐng)回答問(wèn)題:

(1)篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí),應(yīng)將土壤樣品__________,接種到以__________為唯一碳源的培養(yǎng)基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

(2)對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行____________________培養(yǎng),一般操作方法有兩種,其中之一是下圖所示的__________法。

稀釋倍數(shù)

菌落數(shù)

平板編號(hào)

1

2

3

10

420

495

393

100

45

57

51

1000

2

7

3

(3)將酵母菌溶液分別稀釋10倍、100倍、1000倍。每個(gè)濃度都接種三個(gè)平板,每個(gè)平板均接入0.1mL稀釋菌液,該接種方法是__________。培養(yǎng)時(shí),需將培養(yǎng)皿__________培養(yǎng),以防冷凝水造成污染。經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,平板上的菌落數(shù)如上表所示:據(jù)此可得出,每升菌液中酵母菌活菌數(shù)為__________個(gè)。

【答案】 稀釋(溶解) 多氯聯(lián)苯 選擇 純化 平板劃線 稀釋涂布平板 倒置 5.1×107

【解析】試題分析:本題主要考查微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的相關(guān)問(wèn)題,利用選擇培養(yǎng)基篩選出高效分解多氯聯(lián)苯的菌株,其中涉及培養(yǎng)基的配置與選擇,器具的滅菌方法,細(xì)菌分離純化及計(jì)數(shù)方法等。需要學(xué)生掌握以下知識(shí)點(diǎn),1、培養(yǎng)基按功能分為兩類選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基,兩種培養(yǎng)基的制備方法、特征及用途見(jiàn)下表:

種類

制備方法

選擇培養(yǎng)基

培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分,抑制不需要微生物的生長(zhǎng)

根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌,從而提高該菌的篩選率

培養(yǎng)分離出特定微生物,如:加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌

鑒別培養(yǎng)基

在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品

依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)

鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物,如伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分,微生物往往連在一起生長(zhǎng),隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

(1)篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí),應(yīng)將土壤樣品稀釋,接種到以多氯聯(lián)苯為唯一碳源的培養(yǎng)基上;只有能分解多氯聯(lián)苯的菌株才能在這樣的培養(yǎng)基中生存,因此從功能上講,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

(2)對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行純化培養(yǎng),一般操作方法有兩種,即平板劃線法和稀釋涂布平板法,圖示是利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種,把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面

(3)將酵母菌溶液分別稀釋10倍、100倍、1000倍。每個(gè)濃度都接種三個(gè)平板,每個(gè)平板均接入0.1mL稀釋菌液,該接種方法是稀釋涂布平板。培養(yǎng)時(shí),需將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng),以防冷凝水造成污染。對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),一般選擇菌落數(shù)在30~300的進(jìn)行記數(shù),求其平均值,因此選擇稀釋100倍的三個(gè)培養(yǎng)基進(jìn)行計(jì)算,每升溶液中酵母菌活菌數(shù)=(45+57+51)÷3÷0.1×100×1000=5.1×107個(gè)/L。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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(3)在測(cè)定不同光照對(duì)果肉放氧速率的影響時(shí),如不精確控制溫度,則測(cè)得的光照與果肉放氧速率的關(guān)系________。(填“呈正相關(guān)”“呈負(fù)相關(guān)”或“難以確定”)

(4)圖2中不同時(shí)間段曲線的斜率代表光合放氧的速率,對(duì)15~20 min 曲線的斜率幾乎不變的合理解釋是____________________________;若在20min后停止光照,則短時(shí)間葉綠體中含量減少的物質(zhì)有________(填序號(hào):①C5 ②ATP ③[H] ④C3)

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