【題目】大腸桿菌是人和動(dòng)物腸道中普遍存在的一種兼性厭氧菌,在無(wú)氧條件下,大腸桿菌通過(guò)發(fā)酵能將葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N有機(jī)酸并產(chǎn)生 CO2 等氣體。某研究機(jī)構(gòu)使用“濾膜法”對(duì)受污染的河流水體進(jìn)行了大腸桿菌活菌數(shù)目的測(cè)定。請(qǐng)回答:

(1)研究人員向葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液中加入適量的溴麝香草酚藍(lán)水溶液后,裝入右圖所示的試管中,再將污水水樣滴加進(jìn)去震蕩均勻,適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到溶液顏色的變化為由藍(lán)變綠再變黃, 并且在倒置的小管中出現(xiàn)__________。

(2)測(cè)定大腸桿菌活菌數(shù)目時(shí),需制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基中為細(xì)菌提供氮源的物質(zhì)是___________________。為了鑒別大腸桿菌菌落,可向培養(yǎng)基中加入________________作為指示劑。

(3)為了便于統(tǒng)計(jì)污染嚴(yán)重的水體中活菌的數(shù)目,需將水樣進(jìn)行適當(dāng)稀釋,例如取水樣 1ml 加入無(wú)菌水______ml 制備稀釋倍數(shù)為101 的稀釋液,并照此依次制備更高倍數(shù)的稀釋液。每個(gè)稀釋倍數(shù)的菌液取 10ml 進(jìn)行過(guò)濾,然后將濾膜放置在培養(yǎng)基上。為了防止雜菌污染,稀釋、過(guò)濾和放置濾膜等操作都應(yīng)該在________附近進(jìn)行。

(4)將放有濾膜的平板置于適宜條件下培養(yǎng),每隔 12 h 統(tǒng)計(jì)一次菌落的數(shù)目,應(yīng)選取菌落數(shù)目________時(shí)的記錄作為結(jié)果。如果經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后,稀釋倍數(shù)為 102 的 4 個(gè)平板上菌落 數(shù)分別為 43、47、42、48(四個(gè)平板上接種的稀釋液均為 0.1ml ),那么每升河水中約含有大腸桿菌___________個(gè),用這種方法測(cè)定的細(xì)菌數(shù)量要比實(shí)際活菌數(shù)量要少,這是因?yàn)?/span>________________________________________________________________。

【答案】氣泡 牛肉膏和蛋白胨 伊紅美藍(lán) 9 酒精燈火焰 穩(wěn)定 4.5×107 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到是一個(gè)菌落

【解析】

二氧化碳可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。培養(yǎng)各種微生物的培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽伊紅為酸性染料,美藍(lán)為堿性染料,大腸桿菌在含有伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上形成的菌落呈深紫色(黑色),并有金屬光澤,伊紅美藍(lán)是專一鑒別大腸桿菌的指示劑。常用的純化微生物時(shí)的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。

稀釋涂布平板法能用于微生物的計(jì)數(shù),其計(jì)算公式為:1毫升(克)樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×M,其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(毫升),M代表稀釋倍數(shù);用稀釋涂布平板法對(duì)微生物計(jì)數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的是一個(gè)菌落。

(1)由題干在無(wú)氧條件下,大腸桿菌通過(guò)發(fā)酵能將葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N有機(jī)酸并產(chǎn)生CO2等氣體,向葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液中加入適量的溴麝香草酚藍(lán)培養(yǎng)一段時(shí)間的大腸桿菌,可產(chǎn)生CO2氣體,CO2可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃,并且在倒置的小管中出現(xiàn)氣泡。

(2)用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí),培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨能為細(xì)菌提供碳源、氮源、磷酸鹽和維生素;伊紅美藍(lán)是專一鑒別大腸桿菌的指示劑,為了鑒別大腸桿菌菌落,可向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)作為指示劑

(3)用稀釋涂布平板法進(jìn)行對(duì)微生物計(jì)數(shù)時(shí),當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品大約含有多少活菌,若將水樣稀釋101倍,可取水樣1mL加入到9mL的無(wú)菌水中進(jìn)行稀釋;為了防止雜菌污染,整個(gè)操作過(guò)程應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌操作,所以在稀釋、過(guò)濾和旋轉(zhuǎn)濾膜等操作時(shí)都應(yīng)該在酒精燈火焰附近進(jìn)行。

(4)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)的菌落數(shù)目時(shí)應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,如果經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后稀釋倍數(shù)為1024個(gè)平板上菌落數(shù)分別為43、47、42、48,則平板上平均菌落數(shù)=(43+47+42+48)÷4=45個(gè),每毫升河水中約含大腸桿菌數(shù)=(C÷V)×M=(45÷0.1)×102=4.5×104個(gè),每升河水中約含大腸桿菌數(shù)=4.5×104×103=4.5×107個(gè);用稀釋涂布平板法測(cè)定的細(xì)菌數(shù)量比實(shí)際活菌數(shù)量要少,這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的是一個(gè)菌落

練習(xí)冊(cè)系列答案
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B.不同鎘濃度下,處理時(shí)間越長(zhǎng)對(duì)SOD活性的抑制效果就越強(qiáng)

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1)圖甲中過(guò)程表示_________。圖甲中的_____________ (用字母表示)成分沒在圖乙中出現(xiàn)。圖甲過(guò)程中碳是以___________形式傳遞的。

2)該生態(tài)系統(tǒng)的能量最終來(lái)源是__________,其能量流動(dòng)的特點(diǎn)是__________。

3)成分C在該生態(tài)系統(tǒng)中所起的作用是_______________

4)圖中捕食者能依據(jù)被捕食者的氣味捕獵,說(shuō)明信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用是________

5)乙圖中蛇和貓頭鷹的種間關(guān)系是__________;:若草固定的總能量為6.8×109kJ,食草昆蟲和鼠同化的總能量是1.3×108kJ,則人最多能獲得能量________kJ。

6)與森林生態(tài)系統(tǒng)比較,該生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性____________(高、低或相同)

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