Question

【題目】回答下列I、II兩小題。

I．抗蟲的轉基因植物，含有Bt蛋白，也叫毒蛋白，Bt蛋白本身其實沒有任何毒性，但是鱗翅目幼蟲的腸道壁上有一種特別的蛋白，喜歡與Bt蛋白結合，引起腸道壁穿孔，導致幼蟲死亡。

注： Cef， Carb 抑菌類抗生素

（1）抗蟲植物的抗蟲效果與Bt蛋白的表達量直接相關，用________________ 作為抗原，通過制備________________ 作為特異探針，對Bt蛋白表達進行檢測。將Bt蛋白基因導入植物細胞的方法有________________ 和________________ 等。

（2）在農桿菌轉化過程中，防止農桿菌過度生長是轉基因成敗的重要環(huán)節(jié)。因此植物材料和農桿菌共同培養(yǎng)結束后，轉化組織需要________________ 處理，據(jù)圖分析，選擇抗生素的________________ 很關鍵。光電比色法可用于細菌細胞密度的吸光值的測定，OD600指的是某種溶液在600nm波長處的吸光值。吸光值與溶液中吸光物質的濃度呈正比，通常用于細菌細胞密度（OD600）測量；在測量過程中要保持溶液中的細菌處于____狀態(tài)。 如圖可知，________________ （填Cef或Carb）在低濃度條件下對農桿菌有更好的抑制效果。

II．回答與泡菜制作有關的問題：

（1）泡菜發(fā)酵過程中的主要菌種是________________， 在________________ 條件下，微生物將蔬菜中的糖和其他營養(yǎng)物質發(fā)酵成有機酸、________________ 和________________ 等。

（2）在泡菜制作過程中________________ ，________________ 兩部操作主要是為了減少雜菌，還可以采用________________ ，________________ 兩種方法縮短腌制時間。

Answer 1

【答案】Bt蛋白 單克隆抗體 農稈菌轉化法 基因槍法 脫菌 種類和濃度 懸浮 Carb 假絲酵母和乳酸菌 無氧 醇類物質 亞硝酸（HNO2） 熱水洗壇壁兩次 加白酒 入壇前用開水浸泡一下蔬菜 加入腌制過的泡菜汁

【解析】

1.光電比色法是通過測量菌懸液的光密度（OD600）值來估算細菌數(shù)，吸光值與溶液中吸光物質的濃度呈正比。據(jù)圖可知，濃度為300mg/L時兩種抗生素都可以完全抑制農桿菌的生長，所以頭孢霉素（Cef）和羧芐青霉素（Carb）對農桿菌都有很好的抑制效果。

2.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構建，③將目的基因導入受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定。

3. 制作泡菜的實驗原理：
（1）乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸。
（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化。
溫度過高，食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降。
（3）測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標準顯色液目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。

I．（1）抗蟲植物的抗蟲效果與Bt蛋白的表達量直接相關，可用Bt蛋白作為抗原，通過制備單克隆抗體作為特異探針，利用抗原-抗體雜交方法對Bt蛋白表達量進行檢測。將Bt蛋白基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法和基因槍法等。

（2）在農桿菌轉化過程中，防止農桿菌過度生長是轉基因成敗的重要環(huán)節(jié)。因此植物材料和農桿菌共同培養(yǎng)結束后，轉化組織需要脫菌處理，選擇合適的抗生素和使用的抗生素濃度是實驗成敗的關鍵。光比色法可用于細菌細胞密度的測定，在測量過程中要保持溶液中的細菌處于懸浮狀態(tài)。分析圖示可知，Cef（頭孢霉素）和Carb（羧芐霉素）兩種抗生素對農桿菌有很好的抑制效果；當Carb濃度為50mg/L時，OD600幾乎降為0，即細菌細胞數(shù)目為0，說明抗生素Carb濃度為50mg/L時可以完全抑制農桿菌的生長，Carb在低濃度條件下對農桿菌有更好的抑制效果。

II．（1）泡菜發(fā)酵過程中的主要菌種是假絲酵母和乳酸菌； 在無氧條件下，微生物將蔬菜中的糖和其他營養(yǎng)物質發(fā)酵成有機酸、醇類物質和亞硝酸（HNO2）等。

（2）在泡菜制作過程中熱水洗壇壁兩次（去除雜菌）、加白酒（抑制雜菌生長）兩部操作主要是為了減少雜菌污染；還可以采用入壇前用開水浸泡一下蔬菜（殺死植物細胞）、加入腌制過的泡菜汁（可以提供菌種）兩種方法縮短腌制時間。