Question

【題目】下圖為“DNA粗提取和鑒定”實驗的相關(guān)操作；表是研究人員比較了不同貯藏條件對棉葉DNA純度及提取率的影響結(jié)果。請回答下列問題：

不同貯藏條件	鮮葉	冷鮮3d	冷凍3d	冷凍7d	液氮7d
DNA純度	2．00	1．91	1．92	1．73	1．69
DNA提取率	210	198	347	39	126

（DNA純度單位：OD260/OD280值） （DNA提取量單位：）

（1）棉葉細(xì)胞中含有DNA的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有_____________。

（2）圖中①、②、③三個操作圖，按照DNA粗提取操作流程的排序是_____________，三個步驟操作后均需進(jìn)行過濾，完成過濾之后棄去濾液的序號是_____________。

（3）圖1中①的具體操作是_____________。

（4）用二苯胺試劑鑒定，顏色最深的是表中_____________處理后提取的DNA，鑒定中的溶液顏色變化是_____________。

（5）針對第（4）小題的結(jié)果，請?zhí)岢鰞牲c合理的解釋_____________、_____________。

Answer 1

【答案】葉綠體、線粒體和細(xì)胞核 ②①③ ①和③ 取適量蒸餾水沿?zé)�杯�?nèi)壁緩緩加入，并用玻璃棒沿一個方向輕輕攪拌 冷凍3d 逐漸變藍(lán) 在低溫條件下DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定 儲存天數(shù)的增加導(dǎo)致DNA分子容易降解，所以純度降低

【解析】

DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是：

①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；

②DNA不容易酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；

③DNA對于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是不能水解DNA，蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但是對DNA沒有影響；

④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色。

（1）棉葉細(xì)胞含有DNA的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有葉綠體、線粒體和細(xì)胞核。

（2）DNA粗提取的流程是，先用蒸餾水使細(xì)胞吸水漲破，釋放出DNA，用2moL/L的NaCl溶液將DNA分子溶解，然后不斷的稀釋，稀釋NaCl溶液的濃度，降低DNA分子溶解度，再將DNA分子溶解后加入冷的95%的酒精進(jìn)行提純，所以正確的順序是②①③；①加入蒸餾水析出DNA分子，過濾后出去濾液，②是用蒸餾水使細(xì)胞吸水漲破，過濾后收集濾液；③是加入冷的酒精，析出DNA分子，出去濾液，所以需要出去濾液的是①和③。

（3）①是加入蒸餾水，降低NaCl的濃度，使DNA的溶解度降低，析出DNA分子，操作中取適量蒸餾水沿?zé)�杯�?nèi)壁緩緩加，并用玻璃棒沿一個方向輕輕攪拌，直至絲狀物不在增加。

（4）冷凍3d處理提取的DNA量是最多的，因此用二苯胺試劑鑒定，顏色最深的是冷凍3d處理后提取的DNA，DNA的鑒定過程中顏色變化是顏色逐漸變藍(lán)。

（5）從表格中的數(shù)據(jù)看出葉片越新鮮，DNA的純度越高，儲存溫度越低DNA提取率越高，可能的原因是在低溫條件下DNA分子結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定，而儲存天數(shù)的增加導(dǎo)致DNA分子容易降解，所以純度降低。