Question

【題目】為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與實驗?zāi)康牟环�的�? )

A. 檢測C基因是否整合到菊花染色體上用抗原—抗體雜交方法

B. 用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)�入�?xì)胞

C. 在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞

D. 用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒

Answer 1

【答案】A

【解析】

1、基因工程的基本工具：分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、“分子縫合針”--DNA連接酶、“分子運輸車”--載體。
2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④目的基因的檢測與鑒定。
3、標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。
4、目的基因的檢測和表達(dá)：
（1）首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。
（2）其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。
（3）最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的 抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交。
（4）有時還需進(jìn)行個體生物學(xué)水平的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。

根據(jù)分析可知，檢測C基因是否整合到菊花染色體上可用DNA分子雜交技術(shù)，A錯誤；將目的基因?qū)�入到植物�?xì)胞，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，可以將目的基因C導(dǎo)入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA段，之后再用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)�入�?xì)胞染色體上的DNA上，B正確；標(biāo)記基因常用來檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，圖2中顯示標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因，可在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞，C正確；據(jù)圖分析可知，在目的基因的兩端、啟動子和終止子之間都有限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ的切割位點，因此可以用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ切割目的基因和運載體，之后再用DNA連接酶連接形成基因表達(dá)載體，D正確。

故選A。