Question

【題目】下面是用兩種不同的方法制備單克隆抗體的流程圖�；卮鹣铝袉栴}：

(1)甲圖中從產(chǎn)生免疫反應(yīng)的小鼠體內(nèi)得到了抗_____的抗體,說明小鼠體內(nèi)已形成了相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。設(shè)法將B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、_______、電激等。

(2)甲圖中經(jīng)選擇性培養(yǎng)的①______細(xì)胞,還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_____檢測，經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的②細(xì)胞。

(3)乙圖中構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使______在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳治下一代。將重組DNA導(dǎo)入煙草細(xì)胞采用最多的方法是______。

(4)乙圖中將煙草細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因煙草植株涉及的最基本技術(shù)是______，這項(xiàng)技術(shù)依據(jù)的原理是_______。

Answer 1

【答案】 埃博拉病毒 滅活的病毒 雜交瘤 抗體 目的基因 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 植物組織培養(yǎng) 植物細(xì)胞的全能性

【解析】單克隆抗體的制備時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用之一，此過程中需要先注射抗原，使生物體產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，再將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，并篩選出能產(chǎn)生特異性抗體和大量增殖的雜交瘤細(xì)胞，最后經(jīng)過體內(nèi)和體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體．單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的優(yōu)點(diǎn)。單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．兩次抗體檢測：專一抗體檢驗(yàn)陽性。

（1）小鼠注入埃博拉病毒屬抗原，經(jīng)體液免疫產(chǎn)生抗埃博拉病毒的抗體，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞隔合的方法有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。（2）經(jīng)選擇培養(yǎng)基選擇作用只有雜交瘤細(xì)胞能存活，但是雜交瘤細(xì)胞有多種，產(chǎn)生的抗體種類也不同，還要通過抗體檢測選出能產(chǎn)生抗埃博拉病毒的抗體的雜交瘤細(xì)胞。（3）運(yùn)載體能在受體細(xì)胞中存活、增殖，所以目的基因與運(yùn)載體結(jié)合后，也能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳治下一代，將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。（4）將煙草細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因煙草植株的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)，組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

項(xiàng)目	第一次篩選	第二次篩選
篩選原因	誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞	由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞
篩選方法	用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長	用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群
篩選目的	得到雜交瘤細(xì)胞	得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞