Question

回答下列關(guān)于基因工程的問題：

如圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá)，根據(jù)圖示所給信息回答下列問題：

(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時(shí)，用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，露出相同的黏性末端，將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的             ，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。

(2)目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時(shí)，效率還不高；導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌，實(shí)際上有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒；有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A；只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒：

將得到的細(xì)菌涂抹在一個(gè)含有                的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的，反之則沒有。此過程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的兩個(gè)條件                      ；                                            。

(3)若進(jìn)一步鑒定證明細(xì)菌中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒，將得到的細(xì)菌涂抹在一個(gè)含有

                的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，若細(xì)菌                ，則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程，應(yīng)該用                                    作為探針。

（4）使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)，主要是借鑒                        的途徑。

(5) 目的基因表達(dá)成功后，“工程菌”明顯不同于細(xì)菌D。從變異的來源看，此變異屬于         

       。導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么?                    。

Answer 1

（1）DNA連接酶     

（2）氨芐青霉素    具有標(biāo)記基因      能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定的保存    

（3）四環(huán)素   能生長(zhǎng)      放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的胰島素基因  

（4）細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞

（5）基因重組        受體細(xì)胞通過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程合成出相應(yīng)的蛋白質(zhì)（生長(zhǎng)激素）

解析:

考查基因工程的知識(shí)。

（1）連接目的基因和質(zhì)粒切口的酶是DNA連接酶。

（2）檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入可通過檢測(cè)標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物。

（3）檢測(cè)導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒還是重組質(zhì)粒，可通過目的基因插入的位置（四環(huán)素抗性基因）檢測(cè)。

（4）重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞通過病毒感染細(xì)胞方法。

（5）基因工程引起變異的來源是基因重組，目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是目的基因控制合成的蛋白質(zhì)（生長(zhǎng)激素）合成。