回答下列關(guān)于基因工程的問題
下圖1是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線,表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn),圖2、圖3中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。
(1)若對圖2中質(zhì)粒進(jìn)行改造,插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性如何變化,為什么?
(2)圖中將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒,可以只用EcoR I同時酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因,也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因,后一個方法的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止 。
(3)為了獲取重組質(zhì)粒,將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并加入 酶。重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。
(4)圖1過程①可采用的操作方法是 ,過程②可采用的生物技術(shù)是 。過程③可采用的生物技術(shù)是 。
(5)分別從分子水平簡述雌性轉(zhuǎn)基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是_______________。
(1) SmaⅠ識別的DNA序列只有G和C,而G和C之間可以形成三個氫鍵,A和T之間可以形成二個氫鍵,所以SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多,熱穩(wěn)定性就越高 (2分)
(2)只使用EcoR I,則質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同,用連接酶連接時,會產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接物,而利用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ剪切時,質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端不同,用DNA連接酶連接時,不會產(chǎn)生自身連接產(chǎn)物。(2分)
(3) DNA連接酶 篩選 (每空1分)
(4)顯微注射 細(xì)胞培養(yǎng) 胚胎移植技術(shù) (每空1分)
(5) DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA,mRNA翻譯成蛋白質(zhì) (2分)
略
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
回答下列關(guān)于基因工程的問題:
如圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖,所用載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因,質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后,其上的基因能得到表達(dá),根據(jù)圖示所給信息回答下列問題:
(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時,用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒,露出相同的黏性末端,將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的 ,使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。
(2)目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時,效率還不高;導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌,實(shí)際上有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒;有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A;只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒:
將得到的細(xì)菌涂抹在一個含有 的培養(yǎng)基上,能夠生長的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的,反之則沒有。此過程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的兩個條件 ; 。
(3)若進(jìn)一步鑒定證明細(xì)菌中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒,將得到的細(xì)菌涂抹在一個含有
的培養(yǎng)基上培養(yǎng),若細(xì)菌 ,則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程,應(yīng)該用 作為探針。
(4)使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi),主要是借鑒 的途徑。
(5) 目的基因表達(dá)成功后,“工程菌”明顯不同于細(xì)菌D。從變異的來源看,此變異屬于
。導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么? 。
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科目:高中生物 來源:河北省衡水中學(xué)2009—2010學(xué)年度第二學(xué)期期中考試高二生物試卷 題型:綜合題
回答下列關(guān)于基因工程的問題:
如圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖,所用載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因,質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后,其上的基因能得到表達(dá),根據(jù)圖示所給信息回答下列問題:
(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時,用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒,露出相同的黏性末端,將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的 ,使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。
(2)目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時,效率還不高;導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌,實(shí)際上有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒;有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A;只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒:
將得到的細(xì)菌涂抹在一個含有 的培養(yǎng)基上,能夠生長的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的,反之則沒有。此過程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的兩個條件 ; 。
(3)若進(jìn)一步鑒定證明細(xì)菌中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒,將得到的細(xì)菌涂抹在一個含有
的培養(yǎng)基上培養(yǎng),若細(xì)菌 ,則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程,應(yīng)該用 作為探針。
(4)使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi),主要是借鑒 的途徑。
(5)目的基因表達(dá)成功后,“工程菌”明顯不同于細(xì)菌D。從變異的來源看,此變異屬于
。導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么? 。
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科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年江蘇省高三最后一次模擬考試生物試卷 題型:綜合題
回答下列關(guān)于基因工程的問題。
草甘膦是一種廣譜除草劑,其除草機(jī)制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成,最終導(dǎo)致植物死亡。但是,它的使用有時也會影響到植物的正常生長。目前,已發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因,若將該基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞內(nèi), 從而獲得的轉(zhuǎn)基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。
下圖A-F表示6株植物,其中,植物A和D對草甘膦敏感,B和E對草甘膦天然具有抗性,C和F則經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理,但是是否成功還未知。圖1和2分別表示兩段DNA序列。表格中1-4分別表示4種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問題:
(1)若A-C澆清水,D-F澆的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成長的是_________。
(2)若要從大腸桿菌中篩選出含EPSPS基因的突變菌株甲,在大腸桿菌培養(yǎng)基中還必須加入 ___________。
(3)假設(shè)位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列均如圖1所示,則應(yīng)選擇表中酶__________進(jìn)行酶切;若位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列分別如圖1和2所示,則應(yīng)選擇表中酶__________ 進(jìn)行酶切。
(4)假設(shè)大腸桿菌突變菌株甲中EPSPS基因的右側(cè)序列如圖2所示,請?jiān)诜娇騼?nèi)畫出經(jīng)酶切后產(chǎn)生的兩個末端的堿基序列。(2分)
(5)假設(shè)EPSPS基因已被成功轉(zhuǎn)移到植物F中,但植物F仍沒有表現(xiàn)出抗性,分析可能的原因_____________。
下圖甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000對堿基)與大腸桿菌pUC18質(zhì)粒(2.7kb)重組的示意圖。圖中Ap′是抗氨芐青霉素基因,lacZ是顯色基因,其上的EcoRI識別位點(diǎn)位于目的基因插入位點(diǎn)的右側(cè),其控制合成的物質(zhì)能使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色。(圖乙中深色圓點(diǎn)即為藍(lán)色菌落)
(6)圖乙的培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素,請判斷圖乙中所出現(xiàn)的白色和藍(lán)色兩種菌落中,何種會含有重組質(zhì)粒。___________。
(7)現(xiàn)用EcoRI酶切質(zhì)粒,酶切后進(jìn)行電泳觀察,若出現(xiàn)長度為_________kb和 kb的片段,則可以判斷該質(zhì)粒已與目的基因重組成功。(重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點(diǎn)與EcoRI的識別位點(diǎn)之間的堿基對忽略不計(jì))
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科目:高中生物 來源:河北省2009—2010學(xué)年度第二學(xué)期期中考試高二生物試卷 題型:綜合題
回答下列關(guān)于基因工程的問題:
如圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖,所用載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因,質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后,其上的基因能得到表達(dá),根據(jù)圖示所給信息回答下列問題:
(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時,用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒,露出相同的黏性末端,將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的 ,使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。
(2)目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時,效率還不高;導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌,實(shí)際上有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒;有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A;只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒:
將得到的細(xì)菌涂抹在一個含有 的培養(yǎng)基上,能夠生長的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的,反之則沒有。此過程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的兩個條件 ; 。
(3)若進(jìn)一步鑒定證明細(xì)菌中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒,將得到的細(xì)菌涂抹在一個含有
的培養(yǎng)基上培養(yǎng),若細(xì)菌 ,則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程,應(yīng)該用 作為探針。
(4)使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi),主要是借鑒 的途徑。
(5) 目的基因表達(dá)成功后,“工程菌”明顯不同于細(xì)菌D。從變異的來源看,此變異屬于
。導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么? 。
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