Question

【題目】三孢布拉式霉菌是一種可產(chǎn)生胡蘿卜素的真菌，常用于胡蘿卜素的工業(yè)化生產(chǎn)�；卮鹣铝袉栴}：

（1）配制三孢布拉式霉菌的培養(yǎng)基時(shí)，需將pH調(diào)至____（填“酸性”、“中性”或“微堿性”）。

（2）將發(fā)酵后的三孢布拉式霉菌處理后研磨成粉末，加入________________ （填“石油醚”、“乙醇”或“丙酮”）萃取，選擇該萃取劑的依據(jù)是：具有較高的沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且________________________ 。

（3）將提取的胡蘿卜素粗品通過________法進(jìn)行鑒定，據(jù)如圖結(jié)果可判斷出樣品 2 中含有胡蘿卜素，判斷依據(jù)是__________________________________ 。

（4）研究者利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)三孢布拉氏霉菌的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，為了消除蛋白質(zhì)分子原有電荷量對(duì)遷移率的影響，可在凝膠中加入________，原理是___________________________，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于蛋白質(zhì)分子的大小。

Answer 1

【答案】酸性 石油醚 不與水混溶 紙層析 樣品2具有與標(biāo)準(zhǔn)樣對(duì)應(yīng)的色帶1 SDS SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋質(zhì)—SDS混合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量

【解析】

1、胡蘿卜素的提取：

（1）胡蘿卜素的性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。

（2）胡蘿卜素的提取來源：提取天然胡蘿卜素的方法主要有：一是從植物中提��；二是從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲得；三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。

（3）萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。

（4）實(shí)驗(yàn)流程：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃�。ㄊ�油醚）→過濾_→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）。

2、凝膠電泳法：

（1）原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同，在電場(chǎng)中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)方向和運(yùn)動(dòng)速度不同。

（2）分離方法：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。

（3）分離過程：在一定pH下，使蛋白質(zhì)基團(tuán)帶上正電或負(fù)電；加入帶負(fù)電荷多的SDS，形成“蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。

（1）在三孢布拉氏霉菌的發(fā)酵培養(yǎng)基中，為其提供氮源成分的是玉米蛋白水解物和豆粕。在制備該培養(yǎng)基的過程中，滅菌之前應(yīng)將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性。

（2）萃取胡蘿卜素選用石油醚，其原因是石油醚具有較高的沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶。

（3）提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析法進(jìn)行鑒定，據(jù)圖示結(jié)果可判斷出樣品2中含有胡蘿卜素，判斷依據(jù)是樣品2具有與標(biāo)準(zhǔn)樣對(duì)應(yīng)的色帶1。

（4）利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)三孢布拉氏霉菌的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，為了消除蛋白質(zhì)分子原有電荷量對(duì)遷移率的影響，可在凝膠中加入SDS，原理是SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)-SDS混合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于蛋白質(zhì)分子的大小。