Question

【題目】大豆油脂中的化合物種類繁多，但主要成分是甘油三酯，常溫下一般為液態(tài)，不溶于水'易溶于有機溶劑，沸點較高。大豆種子中的油脂多與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，要提取純度較高的大豆油脂，往往需要將油脂成分與蛋白質(zhì)分離．芽孢桿菌是常見的蛋白酶產(chǎn)生菌，廣泛存在于土壤中，較易與其他細菌分離．研究人員利用芽孢桿菌分離大豆油脂與蛋白質(zhì)、以及提取大豆油的流程如下圖�；卮鹣铝袉栴}：

（1）從土壤中分離芽孢桿菌，需要先將土壤樣品稀釋后再接種到固體培養(yǎng)基上，稀釋的目的是____，便于在平板上形成單個菌落。將接種后的平板培養(yǎng)一段時間后，可以根據(jù)__等菌落特征挑選出芽孢桿菌進行擴大培養(yǎng)。

（2）將芽孢桿菌接種到含酪蛋白的固體培養(yǎng)基（酪蛋白使培養(yǎng)基呈不透明的乳白色）上，培養(yǎng)一段時間后，在某些菌落周圍會形成透明圈，原因是__。根據(jù)_____就可篩選出比較高效的目的菌株。

（3）將篩選到的目的菌株擴大培養(yǎng)后，接種到含有大豆原料的液體培養(yǎng)基中進行振蕩培養(yǎng)，振蕩的目的是____，培養(yǎng)過程中還需要嚴格控制____等條件（至少答出兩點）。

（4）芽孢桿菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，將培養(yǎng)液進行離心分離，在分離得到的培養(yǎng)液中加入乙醚完成過程①，這種提取大豆油脂的方法叫做____法。獲得純凈大豆油還需要完成過程②，該過程的主要目的是__________________。

Answer 1

【答案】將聚集在一起的微生物分散成單個細胞 顏色、形狀、大小和隆起程度等 芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶將酪蛋白分解 透明圈的大小 增加培養(yǎng)液中的溶氧量、使菌種與培養(yǎng)液充分接觸 pH、溫度、培養(yǎng)液濃度 萃取 除去萃取劑（乙醚）

【解析】

稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞。計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計數(shù)。

（1）稀釋的目的是將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，便于在平板上形成單個菌落。通常是細菌在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）生長發(fā)育，形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細胞的集團，稱之為菌落�？梢愿鶕�(jù)顏色、形狀、大小和隆起程度等等菌落特征挑選出芽孢桿菌進行擴大培養(yǎng)。

（2）芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶將酪蛋白分解，因此在芽孢桿菌周圍會形成透明圈。根據(jù)透明圈的大小就可篩選出比較高效的目的菌株，透明圈大的產(chǎn)生的蛋白酶多，分解作用顯著。

（3）液體培養(yǎng)基常振蕩培養(yǎng)，振蕩的目的是增加培養(yǎng)液中的溶氧量、使菌種與培養(yǎng)液充分接觸。為了使目的菌株更好地生長，培養(yǎng)過程中還需要嚴格控制pH、溫度、培養(yǎng)液濃度等條件。

（4）在分離得到的培養(yǎng)液中加入乙醚（低沸點的有機溶劑），使芳香油充分溶解，稱為萃取法，然后蒸去低沸點的溶劑，剩下的就是大豆油脂。獲得純凈大豆油還需要完成過程②，該過程的主要目的是除去萃取劑（乙醚）。