Question

【題目】（金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病。金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色，從而形成透明圈。下圖為定性檢測(cè)鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請(qǐng)回答相關(guān)問題。

（1）7．5％NaCl肉湯培養(yǎng)基可為微生物提供的營養(yǎng)成分包括_________________________，用7．5％NaCl肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是____________________。

（2）操作中在血平板上的接種方法是____________，接種操作前后需要對(duì)接種工具進(jìn)行_____滅菌。

（3）在制備血平板時(shí)需將pH調(diào)節(jié)至_________（“微酸性”或“微堿性”）后滅菌，待培養(yǎng)基______后，再加入適量血液。按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于______培養(yǎng)基。

（4）在無菌室內(nèi)，經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)__________的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對(duì)本操作進(jìn)行完善，完善的方案是_________________________________________。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、水和無機(jī)鹽 增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量 平板劃線法 灼燒 微堿性 冷卻 鑒別 周圍存在透明圈 設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對(duì)照組

【解析】

（1）微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及生長因子。

（2）培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）；②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）。

（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落。

（4）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)．當(dāng)我們?cè)诤�有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物．當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

（1）7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基中含有蛋白質(zhì)，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化鈉，所以提供的營養(yǎng)物質(zhì)為碳源、氮源、水和無機(jī)鹽；高濃度的鹽溶液可以對(duì)微生物進(jìn)行選擇，而葡萄球菌可以生存在高濃度的鹽溶液中，進(jìn)而增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量。

（2）使用接種環(huán)進(jìn)行接種應(yīng)該只用平板劃線法；接種工具滅菌的方式是灼燒。

（3）血液是堿性的，所以培養(yǎng)基應(yīng)該調(diào)至堿性；滅菌法方法是高壓蒸汽滅菌法，所以應(yīng)該等到培養(yǎng)基冷卻后加入血液，否則會(huì)破壞血細(xì)胞；由于該培養(yǎng)基能夠鑒別是否含有葡萄球菌，所以屬于鑒別培養(yǎng)基。

（4）根據(jù)題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，所以如果經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)透明圈的菌落，說明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；但這個(gè)實(shí)驗(yàn)要這是對(duì)照實(shí)驗(yàn)，對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)是在培養(yǎng)基中不加鮮牛奶。