Question

【題目】酵母菌與人類的關(guān)系密切，是一種單細胞真菌，在有氧和無氧環(huán)境下都能生存，屬于兼性厭氧菌，是工業(yè)上最重要，應(yīng)用最廣泛的一類微生物，在釀造、食品、醫(yī)藥工業(yè)等方面占有重要地位。

（1）在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，起主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。酒精發(fā)酵時，一般將溫度控制在________；在________________的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。

（2）野生酵母菌制酒效率低，為了篩選出高產(chǎn)酒精的酵母菌株，某生物興趣小組設(shè)計了實驗方案（略），請回答有關(guān)問題：

①培養(yǎng)基的配制：常用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中需添加了青霉素，其目的是______________________；培養(yǎng)基滅菌前要將pH調(diào)至________。

②酵母菌的液體培養(yǎng)與計數(shù)：對培養(yǎng)液中的酵母菌逐個計數(shù)是非常困難的，常采用________的方法；發(fā)酵過程中檢測酵母菌數(shù)量可采用________法或稀釋涂布平板法計數(shù)。

③酵母菌的分離純化：分離純化的方法很多，除平板劃線法外，________也是一種常用的接種方法，這一方法常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，因為________________________。

（3）胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可從產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌菌體中提取獲得，流程如下：

萃取的效率主要取決于________________，同時還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等條件的影響；將提取的胡蘿卜素樣品通過________進行鑒定。

Answer 1

【答案】18~25℃ 缺氧、呈酸性 抑制細菌（放線菌）生長 酸性 抽樣檢測 顯微鏡直接計數(shù) 稀釋涂布平板法 當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌 萃取劑的選擇和使用量 紙層析

【解析】

酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下進行有氧呼吸大量繁殖，在無氧條件下能進行酒精發(fā)酵，20℃左右最適合酵母菌繁殖。

（1）溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時，一般將溫度控制在18～25℃；在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。

（2）①青霉素是廣譜性抗生素，能有效殺死細菌和放線菌，可選擇性培養(yǎng)真菌；

②對培養(yǎng)液中的酵母菌逐個計數(shù)是非常困難的，常采用抽樣檢測的方法；發(fā)酵過程中檢測酵母菌的數(shù)量可采用顯微鏡直接計數(shù)法或稀釋涂布平板法計數(shù)；

③稀釋涂布平板法和平板劃線法是常用的接種方法，這兩種方法都可將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面，最終得到由一個細胞繁殖而來的菌落，要計數(shù)時應(yīng)用稀釋涂布平板法。

（3）萃取的效率主要取決于萃取劑的選擇和使用量，同時還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等條件的影響；將提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進行鑒定。