Question

【題目】農(nóng)業(yè)科技工作者在煙草中找到一種抗病基因，現(xiàn)擬采用基因工程技術(shù)將該基因轉(zhuǎn)入棉細(xì)胞中，培育抗病棉品系。請回答下列問題。

（1）要獲得該抗病基因，可采用從基因文庫中獲取、_______________ 等方法。將抗病基因轉(zhuǎn)入棉細(xì)胞時，最常用的運(yùn)載體是__________。

（2）若運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如圖示：

則能與該運(yùn)載體連接的抗病基因分子末端是（____）

（3）切割完成后，需用_____ 酶將運(yùn)載體與該抗病基因連接，得到_______分子。

（4）將抗病基因轉(zhuǎn)入棉細(xì)胞時，可先將重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌______ 的T-DNA上，再用該農(nóng)桿菌去侵染______，從培養(yǎng)得到的植株中篩選獲得抗病棉。

（5）這種方法比較經(jīng)濟(jì)和有效，稱作______法。除此之外，還有基因槍法和_______法等。

（6）將含抗病基因的棉細(xì)胞培養(yǎng)得到完整抗病棉還需用____________ 技術(shù)。

Answer 1

【答案】 化學(xué)方法（人工合成PCR擴(kuò)增） 質(zhì)粒 A DNA連接 重組DNA Ti質(zhì)粒 棉細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 花粉管通道法 植物組織培養(yǎng)

【解析】本題考查基因工程，要求考生理解基因工程的原理和操作程序，掌握將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法，明確基因工程在植物育種上的應(yīng)用。

（1）根據(jù)題意，要獲得該抗病基因，可采用從基因文庫中獲取、化學(xué)方法（人工合成PCR擴(kuò)增）等方法。植物基因工程中將抗病基因轉(zhuǎn)入棉細(xì)胞時，最常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒。

（2）基因工程中，將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合需要使用DNA連接酶，遵循堿基互補(bǔ)配對原則，將互補(bǔ)的黏性末端連接起來，分析EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段可知，其黏性末端的堿基序列可以和A選項(xiàng)的黏性末端進(jìn)行連接。

（3）基因工程中，可利用DNA連接酶將運(yùn)載體目的基因基因連接，得到重組DNA分子。

（4）將抗病基因轉(zhuǎn)入棉細(xì)胞時，可先將重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再用該農(nóng)桿菌去侵染棉細(xì)胞，從培養(yǎng)得到的植株中篩選獲得抗病棉。

（5）利用農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒將目的基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞的方法叫農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此之外，將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法還有基因槍法和花粉管通道法等。

（6）將含抗病基因的棉細(xì)胞培養(yǎng)成完整抗病棉利用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。