Question

【題目】科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)，但在進(jìn)行基因工程的操作過程中，需要同特點(diǎn)的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選，已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是﹣G↓GATCC﹣，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是﹣G↓GATC﹣，請據(jù)圖回答：

（1）過程①表示的是采取的方法來獲取目的基因．
（2）根據(jù)圖示分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，應(yīng)用限制酶切割質(zhì)粒，用限制酶切割目的基因．用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體后形成的黏性末端通過原則進(jìn)行連接．
（3）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是 ．
（4）人體的生長激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)是因?yàn)?/span> ． 寫出目的基因在細(xì)菌中表達(dá)的過程 ．
（5）將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的，（填能或不能）說明一定導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，因?yàn)?/span> ．

Answer 1

【答案】
（1）反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）
（2）Ⅰ；Ⅱ；堿基互補(bǔ)配對(duì)
（3）人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同
（4）共用一套（遺傳）密碼子；
（5）不能；如果導(dǎo)入普通質(zhì)粒也能在含有安芐青霉素的培養(yǎng)基上生長
【解析】解：（1）過程①是以mRNA為模板形成基因的過程，屬于反轉(zhuǎn)錄，此過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與．（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需用限制酶對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割以形成相同的黏性末端．質(zhì)粒如果用限制酶Ⅱ來切割的話，將會(huì)在質(zhì)粒在出現(xiàn)兩個(gè)切口且抗生素抗性基因全被破壞，故質(zhì)粒只能用限制酶Ⅰ切割（破壞四環(huán)素抗性而保留氨芐青霉素抗性，即將來形成的重組質(zhì)粒能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生存，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生存）；目的基因兩端都出現(xiàn)黏性末端時(shí)才能和質(zhì)粒發(fā)生重組，故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割時(shí)，才會(huì)在兩端都出現(xiàn)黏性末端．黏性末端其實(shí)是被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，這個(gè)切口上帶有幾個(gè)伸出的核苷酸，它們之間正好通過堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行連接．（3）來源不同的DNA之所以能發(fā)生重新組合，主要原因是兩者的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)相同，都是雙螺旋結(jié)構(gòu)，基本組成單位都是脫氧核苷酸等．（4）所有的生物都共用一套密碼子，所以人體的生長激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)，過程是生長激素基因→mRNA→生長激素．（5）因本題上有2個(gè)標(biāo)記基因，但抗四環(huán)素基因被插入的目的基因破壞掉，因此剩下的是抗氨芐青霉素抗性基因，如果在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長，說明已經(jīng)導(dǎo)入了重組質(zhì)�；蚱胀ㄙ|(zhì)粒A，因?yàn)槠胀ㄙ|(zhì)粒和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素的基因．
所以答案是：（1）反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）（2）Ⅰ；Ⅱ；堿基互補(bǔ)配對(duì)（3）人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同（4）共用一套（遺傳）密碼子； （5）不能；如果導(dǎo)入普通質(zhì)粒也能在含有安芐青霉素的培養(yǎng)基上生長
【考點(diǎn)精析】解答此題的關(guān)鍵在于理解基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)．