Question

【題目】如圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗病小麥的過程。請(qǐng)據(jù)圖回答問題：

(1)重組質(zhì)粒T除含有目的基因外，還必須有________、________和________等。

(2)圖示中將基因表達(dá)載體構(gòu)建完成后沒有直接導(dǎo)入農(nóng)桿菌，而是先將其導(dǎo)入大腸桿菌，目的是____________________________。

(3)在步驟⑤⑥中都需用________處理。為了確認(rèn)目的基因通過⑦導(dǎo)入植物細(xì)胞后是否轉(zhuǎn)錄，通常采用______________法進(jìn)行檢測(cè)；驗(yàn)證目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后是否成功表達(dá)，通常采用______________法從分子水平進(jìn)行檢測(cè)。

(4)假設(shè)該抗病基因D，通過基因工程導(dǎo)入小麥后連接到小麥的一條染色體上，則該小麥進(jìn)行減數(shù)分裂的細(xì)胞在聯(lián)會(huì)時(shí)有________個(gè)D基因。

Answer 1

【答案】啟動(dòng)子 終止子 標(biāo)記基因 獲取大量重組質(zhì)粒(讓目的基因擴(kuò)增) Ca2＋ 分子雜交 抗原—抗體雜交 2

【解析】

1、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用．基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因。

2、農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。

（1）將目的基因和質(zhì)粒重組成重組質(zhì)粒的過程是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因。故重組質(zhì)粒T除含有目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。

（2）圖示中將基因表達(dá)載體構(gòu)建完成后沒有直接導(dǎo)入農(nóng)桿菌，而是先將其導(dǎo)入大腸桿菌，目的是獲取大量重組質(zhì)粒(讓目的基因擴(kuò)增)。

（3）在步驟⑤⑥都需要將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，故都需用Ca2＋處理，使細(xì)胞處于感受態(tài)。檢測(cè)目的基因在植物細(xì)胞內(nèi)是否轉(zhuǎn)錄，根據(jù)轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物RNA與DNA中的模板鏈成堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則，采用分子雜交法進(jìn)行檢測(cè)；驗(yàn)證目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后是否成功表達(dá)，通常采用抗原—抗體雜交法從分子水平進(jìn)行檢測(cè)。

（4）假設(shè)該抗病基因D，通過基因工程導(dǎo)入小麥后連接到小麥的一條染色體上，經(jīng)過減數(shù)分裂第一次間期DNA復(fù)制，每條染色體上含有兩個(gè)染色單體，故在減數(shù)第一次分裂前期同源染色體聯(lián)會(huì)時(shí)有2個(gè)D基因。