【題目】胰島素A、B鏈分別表達(dá)法是生產(chǎn)胰島素的方法之一. 1是該方法所用的基因表達(dá)載體,圖2表示利用大腸桿菌作為工 程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程(融合蛋白 A、B分別表示β﹣半乳糖苷酶與胰島素AB鏈融合的蛋白).

1)圖1基因表達(dá)載體中沒(méi)有標(biāo)注出來(lái)的基本結(jié)構(gòu)是__。

2)圖1中啟動(dòng)子是__ 酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能啟動(dòng)目的基因的表達(dá);氨芐青霉素抗性基因的作用是__。

3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)必需的工具酶有__。

4β﹣半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達(dá),可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏在內(nèi)部,其意義在于__。

5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈,且β﹣半乳糖苷酶被切成多個(gè)肽段,這是因?yàn)?/span>__。

6)根據(jù)圖2中胰島素的結(jié)構(gòu),請(qǐng)推測(cè)每個(gè)胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量.你的推測(cè)結(jié)果是__,理由是__

7)如果圖1所示的載體可被A、BC三種限制性內(nèi)切酶同時(shí)切割.單獨(dú)A切割得一條長(zhǎng)鏈,單獨(dú)B切也得一條長(zhǎng)鏈,AC同時(shí)切割得2個(gè)500bp1個(gè)2666bp片段,BC同時(shí)切割得2個(gè)250bp1個(gè)3166bp片段.若以A的切割位點(diǎn)為計(jì)算起點(diǎn),則B的切割位點(diǎn)與A點(diǎn)最短長(zhǎng)度為__C的兩個(gè)切割位點(diǎn)與A點(diǎn)的最短距離分別為__、__。

8)如限制酶SmaI能識(shí)別如圖3的「5‘CCCGGG3’6個(gè)堿基序列,并在中央(圖中箭頭位置)切斷DNA.則用限制酶SmaI處理如圖的線狀雙鏈DNA時(shí),請(qǐng)以箭頭標(biāo)出切割位置。

____________

【答案】終止子 RNA聚合 作為標(biāo)記基因,將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來(lái) 限制酶和DNA連接酶 防止胰島素的A、B鏈被菌體內(nèi)蛋白酶降解 β﹣半乳糖苷酶中含多個(gè)甲硫氨酸,而胰島素A、B鏈中不含甲硫氨酸 至少2個(gè) 兩條肽鏈的一端各有一個(gè)游離的氨基,氨基酸的R基中可能還含有游離的氨基 750bp 500bp 1000bp

【解析】

(1)根據(jù)題意和圖示分析可知:圖1基因表達(dá)載體中已有目的基因、啟動(dòng)子和標(biāo)記基因,所以沒(méi)有標(biāo)注出來(lái)的基本結(jié)構(gòu)是終止子。

(2)圖1中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能啟動(dòng)目的基因的表達(dá)即轉(zhuǎn)錄過(guò)程;氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因,將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來(lái)。

(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中,必須用相同的限制酶切割(含目的基因的外源DNA分子)和運(yùn)載體,以產(chǎn)生相同的黏性末端,再加入DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子。

(4)β﹣半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達(dá),可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏在內(nèi)部,這樣可以防止胰島素的A、B鏈被菌體內(nèi)蛋白酶降解。

(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,由于β﹣半乳糖苷酶中含有多個(gè)甲硫氨酸,而胰島素的A、B鏈中不含甲硫氨酸,所以用溴化氰處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈,且β﹣半乳糖苷酸被切成多個(gè)肽段。

(6)由于一個(gè)肽鏈中至少有一個(gè)游離的氨基和一個(gè)游離的羧基,在肽鏈內(nèi)部的R基中可能也有氨基和羧基,而胰島素含有A鏈和B鏈,所以每個(gè)胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量至少是2個(gè)。

(7)分析題意可知,限制酶A和B在質(zhì)粒上均只含有一個(gè)切割位點(diǎn),限制酶C在質(zhì)粒上有2個(gè)切割位點(diǎn)。由于B和C同時(shí)切割得2個(gè)250bp和1個(gè)3166bp片段,說(shuō)明限制酶B的切點(diǎn)在限制酶C的兩個(gè)短距離的切點(diǎn)之間,因此若以A的切割位點(diǎn)為計(jì)算起點(diǎn),則B的切割位點(diǎn)與A點(diǎn)最短長(zhǎng)度=500+250=750bp,則畫(huà)圖可知C的兩個(gè)切割位點(diǎn)與A點(diǎn)的最短距離分別為500bp、1000bp。

(8)分析圖解可知,限制酶SmaI能識(shí)別如圖3的「5‘﹣CCCGGG﹣3’」6個(gè)堿基序列,,并在中央切斷DNA形成的平末端,因此它的切割位點(diǎn)為C和G之間。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】人類的白化病是常染色體隱性遺傳病,如圖為一個(gè)有白化病患者家系的系譜圖。以下關(guān)于此家系的敘述中,正確的是( 。

A.個(gè)體7是攜帶者的概率是1/2

B.個(gè)體4的父母中一定有一位是白化病患者

C.個(gè)體2一定不攜帶白化病基因

D.個(gè)體3一定是白化病基因攜帶者

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】生物膜系統(tǒng)在細(xì)胞的生命活動(dòng)中發(fā)揮著極其重要的作用.圖1-3表示3種生物膜結(jié)構(gòu)及其所發(fā)生的部分生理過(guò)程.下列說(shuō)法正確的是( 。

①圖1表示的生理過(guò)程是有氧呼吸的第三階段

②圖3中ATP參與的主要生理過(guò)程是CO2固定和C3的還原

③葉肉細(xì)胞與人體肝臟細(xì)胞都具有圖1、2中的膜結(jié)構(gòu)

A. ①② B. ①③ C. ②③ D. ①②③

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下圖表示甲狀腺活動(dòng)調(diào)節(jié)的示意圖。對(duì)這一調(diào)節(jié)的描述中,錯(cuò)誤的是

A. ①與②物質(zhì)分別表示促甲狀腺激素釋放激素和促甲狀腺激素

B. 圖中的a和b表示抑制,c和d表示促進(jìn)

C. 垂體的分泌活動(dòng)只受下丘腦的影響

D. 由圖中可知,內(nèi)分泌活動(dòng)受神經(jīng)系統(tǒng)支配

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】脊髓灰質(zhì)炎又稱小兒麻痹癥,是由脊髓灰質(zhì)炎病毒侵犯脊髓,造成肌肉麻痹引起的小兒急性傳染病,輕者肢體發(fā)育不良,重者癱瘓甚至危及生命.影起脊髓灰質(zhì)炎的病毒為屬于單正鏈RNA病毒(+ssRNA),該病毒進(jìn)入靶細(xì)胞后,其核酸可直接翻譯,合成的功能蛋白進(jìn)入滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)促進(jìn)病毒自身的復(fù)制.脊髓灰質(zhì)炎病毒入侵和增殖過(guò)程如圖示意.

1)圖中結(jié)構(gòu)A表示__;過(guò)程“2”表示__ 參與過(guò)程“8”和過(guò)程“9”的酶是__。

2)脊髓灰質(zhì)炎病毒能入侵特定的宿主細(xì)胞,是因?yàn)樗拗骷?xì)胞表面有相應(yīng)的__(結(jié)構(gòu))。脊髓灰質(zhì)炎病毒的宿主細(xì)胞主要是__。

A感覺(jué)神經(jīng)元 B中間神經(jīng)元 C 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元 D肌肉細(xì)胞

3)如果用35S32P標(biāo)記脊髓灰質(zhì)炎病毒,則該病毒入侵宿主細(xì)胞后,可在宿主細(xì)胞內(nèi)測(cè)到的放射性元素是__。

4)過(guò)程“4”“5”中一個(gè)RNA 能翻譯成P1P2、P3三種蛋白,原因是__; P2P3表示功能蛋白,則P1表示__蛋白。

5)脊髓灰質(zhì)炎病毒的RNA復(fù)制場(chǎng)所是[]__.假設(shè)脊髓灰質(zhì)炎病毒的RNA中含有堿基AC、G、U的數(shù)量分別為a、bc、d,則病毒RNA復(fù)制出一個(gè)子代病毒RNA的過(guò)程中,需要游離的腺嘌呤核苷酸數(shù)量為__。

6)脊髓灰質(zhì)炎病毒在入侵宿主細(xì)胞過(guò)程中,其遺傳信息傳遞途徑是__(不包括宿主細(xì)胞本身的遺傳信息傳遞)

7)疫苗的研制,對(duì)于預(yù)防傳染病起到積極的作用.常用的脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗屬于減毒的活疫苗,下列有關(guān)減毒活疫苗的敘述中正確的是__(不定項(xiàng)選擇)

A減毒活疫苗是改變?cè)《镜鞍踪|(zhì)外殼,而核酸不改變

B減毒活疫苗是改變?cè)《镜暮怂,降低其破壞力,但是編碼蛋白質(zhì)外殼的基因不改變

C減毒活疫苗去除原病毒的核酸,但保留蛋白質(zhì)的外殼

D減毒活疫苗進(jìn)入人體后,能生長(zhǎng)繁殖,對(duì)身體刺激時(shí)間長(zhǎng)

E 減毒活疫苗對(duì)人體刺激時(shí)間短,產(chǎn)生免疫力不高,需多次重復(fù)注射疫苗

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下列四幅圖表示了在肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)(攪拌強(qiáng)度、時(shí)長(zhǎng)等都合理)中相關(guān)含量的變化,下列敘述正確的是

A.圖甲表示在32P標(biāo)記的噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中,沉淀物放射性含量的變化

B.圖乙表示在35S標(biāo)記的噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中,沉淀物放射性含量的變化

C.圖丙表示艾弗里的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,R型細(xì)菌與S型細(xì)菌的數(shù)量變化

D.圖丁表示艾弗里的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,R型細(xì)菌與S型細(xì)菌的數(shù)量變化

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下圖為某真核生物遺傳信息傳遞示意圖,其中a、b、c表示過(guò)程,①②③④⑤代表物質(zhì),起始密碼子為AUG。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:

1 a過(guò)程表示DNA復(fù)制,則所需要的酶有_______________,b過(guò)程發(fā)生的主要場(chǎng)所是__________。

2)蛋白質(zhì)合成過(guò)程包括[ ]__________[ ]___________

3)物質(zhì)②④均為RNA,其中④的種類有_________________

4)一般高度分化的細(xì)胞中遺傳信息的傳遞不存在__________(填字母)過(guò)程,該過(guò)程的特點(diǎn)是________________________________________。

5)圖中進(jìn)行c過(guò)程的方向是______________________(填由右向左由左向右)。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】某種植物種子經(jīng)低溫處理一段時(shí)間后,能夠提早萌發(fā)。在低溫處理過(guò)程中,種子內(nèi)的激素含量變化如圖所示。據(jù)圖分析,下列有關(guān)推斷錯(cuò)誤的是(

A.脫落酸對(duì)種子的萌發(fā)起抑制作用

B.噴灑細(xì)胞分裂素溶液有利于種子儲(chǔ)藏

C.脫落酸與赤霉素是相互拮抗的關(guān)系

D.植物生命活動(dòng)在多種激素相互協(xié)調(diào)下進(jìn)行

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】圖是生長(zhǎng)素濃度與所起作用的關(guān)系曲線圖,下列說(shuō)法不正確的是( )

A.根的向地性實(shí)驗(yàn)中,若測(cè)得的根的遠(yuǎn)地側(cè)生長(zhǎng)素濃度為a,則近地側(cè)生長(zhǎng)素濃度應(yīng)大于c

B.莖的背地性實(shí)驗(yàn)中,若測(cè)得莖的遠(yuǎn)地側(cè)生長(zhǎng)素濃度為a,則近地側(cè)生長(zhǎng)素濃度應(yīng)在ac

C.頂端優(yōu)勢(shì)現(xiàn)象中,若測(cè)得頂芽生長(zhǎng)素濃度為a,則側(cè)芽生長(zhǎng)素濃度應(yīng)大于c

D.無(wú)論是根的向地性還是莖的背地性都體現(xiàn)了生長(zhǎng)素作用的兩重性

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