Question

【題目】科學(xué)家將綠色熒光蛋白(GFP)基因轉(zhuǎn)入小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)內(nèi)，GFP基因若表達(dá)就會使細(xì)胞帶有綠色熒光，繼而利用帶有綠色熒光的ES細(xì)胞培育出嵌合型的小鼠用于科學(xué)研究，流程如圖所示。請回答：

(1)在步驟①中構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要在GFP基因的首端加入____________酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)GFP基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得GFP。GFP基因的尾端還需有_________，使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止下來。

(2)步驟②的受體細(xì)胞是小鼠ES細(xì)胞，ES細(xì)胞一般從囊胚的___________分離得到，且ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為________________的特點(diǎn)。在培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞充滿培養(yǎng)皿底部后停止分裂，這種現(xiàn)象稱為__________________。如果想繼續(xù)培養(yǎng)則需要重新用__________處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為____________________培養(yǎng)。

(3)圖中重組囊胚在步驟⑤之前要先檢測是否有綠色熒光細(xì)胞，再通過___________技術(shù)移入代孕母鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。

Answer 1

【答案】RNA聚合 終止子 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯 接觸抑制 胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) 傳代 胚胎移植

【解析】

本題目考查基因工程原理以及胚胎移植相關(guān)內(nèi)容，分析題圖：圖示為是轉(zhuǎn)基因綠色熒光嵌合小鼠的培育過程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；③表示受精作用；④表示早期胚胎發(fā)育過程；⑤表示胚胎移植過程；⑥表示妊娠產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因鼠的過程。

（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點(diǎn)，能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程，因此，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，必須在目的基因首端加入啟動(dòng)子，在末端加入終止子，使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止下來；

（2）ES細(xì)胞來自早期胚胎（囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)），ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯，對ES細(xì)胞進(jìn)行的初次培養(yǎng)成為原代培養(yǎng)，在培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞充滿培養(yǎng)皿底部后停止分裂，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制，已經(jīng)接觸抑制的細(xì)胞需要用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)，使細(xì)胞分散，便于傳代培養(yǎng)；

（3）由圖可知，目的基因和標(biāo)記基因都是GFP基因，因此圖中重組囊胚在步驟⑤之前要先檢測是否有綠色熒光細(xì)胞，再通過胚胎移植技術(shù)移入代孕母鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。