Question

【題目】2015年11月19日，經(jīng)過全面的科學(xué)論證，美國食品與藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)了世界上第一種食用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物——AquAdvantage 轉(zhuǎn)基因大西洋鮭魚，俗稱三文魚（過程如圖①②）。 這種轉(zhuǎn)基因三文魚生長速度約為普通三文魚的兩倍，可節(jié)省75%的飼料成本。如果將抗凍蛋白基因?qū)�入番茄可獲得抗凍番茄。

（1）①代表的過程是______________，②過程常以魚的_______為受體細(xì)胞。

（2）如圖所示，質(zhì)粒上有AluⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、HindⅢ等四種限制酶切割位點(diǎn)，ampr為抗氨芐青霉素基因；抗凍蛋白基因上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ等三種限制酶切割位點(diǎn)。在進(jìn)行③基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中，為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用_______和_______兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒和目的基因進(jìn)行切割。

（3）構(gòu)建的基因表達(dá)載體中除了目的基因外，還必須有______，____終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。

（4）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為__________。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞時(shí)，常選擇愈傷組織為受體細(xì)胞的原因是_______，將目的基因?qū)�入番茄�?xì)胞最常采用的方法是________法。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因番茄的DNA是否插入了目的基因，常用_______技術(shù)。

Answer 1

【答案】目的基因的獲取 受精卵 Pst I Sam I 啟動(dòng)子 標(biāo)記基因 轉(zhuǎn)化 細(xì)胞的全能性高 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 DNA分子雜交技術(shù)

【解析】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確各選項(xiàng)。

分析題圖：圖示是將抗凍蛋白基因?qū)�入番茄可獲得抗凍番茄的過程，其中①表示獲取目的基因的過程，②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程，③表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，④表示目的基因的檢測(cè)和表達(dá)。

（1）①代表目的基因的獲取過程；②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程，該過程常以魚的受精卵為受體細(xì)胞。
（2）如圖所示，質(zhì)粒上有AluⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、HindⅢ等四種限制酶切割位點(diǎn)，ampr為抗氨芐青霉素基因；抗凍蛋白基因上有PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ等三種限制酶切割位點(diǎn)。在進(jìn)行③基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中，不能用AluⅠ切割，這樣會(huì)破壞目的基因；不能用PstI一種酶切割，這樣可能會(huì)導(dǎo)致酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接；不能用HindⅢ切割，因?yàn)楹�有目的基因�?/span>DNA分子上沒有該酶的切割位點(diǎn)。因此，在此實(shí)例中，為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，應(yīng)該選用PstI和 SamI兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒和目的基因進(jìn)行切割。
（3）基因表達(dá)載體的組成包括目的基因、啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。
（4）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為轉(zhuǎn)化。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞時(shí)，常選擇愈傷組織為受體細(xì)胞，原因是細(xì)胞的全能性高；將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞最常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因番茄的DNA是否插入了目的基因，常用DNA分子雜交技術(shù)。