Question

【題目】乙肝病毒是一種DNA病毒。中國的乙肝病毒攜帶者約占總人口的10%。我國科學家通過基因工程生產出乙型肝炎病毒疫苗，為預防乙肝提供了有力的保障。請回答下列問題：

（1）乙肝病毒專一侵染肝細胞的原因是______________________________________。

（2）通過基因工程生產乙肝疫苗的過程如圖所示：

乙肝病毒有關基因細菌大量生產疫苗

a．若要獲得大量的目的基因，可采用PCR技術進行體外擴增，該技術中使用的需要的酶是____________酶，引物有________種。

b．在①②過程中需使用的工具酶是________________。②過程中常用的載體是________。

c．為提高②過程的轉化效率，常采用的方法是________________________。

（3）使用酵母菌作為受體菌生產乙肝疫苗的效果更好，從細胞結構的角度分析，原因是________________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】肝細胞表面有乙肝病毒的受體 Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶） 2 限制酶和DNA連接酶 質粒 用Ca2＋溶液處理細菌 酵母菌具有內質網、高爾基體，可以對核糖體合成的肽鏈進行剪切、折疊、加工、修飾等處理

【解析】

基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）肝細胞表面有乙肝病毒的受體，因此乙肝病毒專一侵染肝細胞。
（2）a、PCR技術可體外大量擴增目的基因，該技術的條件之一是需要2種引物，其作用是使DNA聚合酶能夠從引物的結合端開始連接脫氧核苷酸，同時需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶的催化。
b、圖中①表示獲取目的基因的過程，該過程需要限制酶，②包括基因表達載體的構建過程，而構建基因表達載體時需要限制酶和DNA連接酶，同時該過程中常以質粒作為載體。c將目的基因導入微生物細胞常用感受態(tài)轉化法，即用Ca2+（CaCl2）溶液處理細菌，使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞。
（3）使用酵母菌作為受體菌生產乙肝疫苗的效果更好，從細胞結構的角度分析，原因是酵母菌是真核生物，具有內質網、高爾基體，可以對核糖體合成的肽鏈進行剪切、折疊、加工、修飾等處理。