Question

【題目】某研究團隊擬從餐廚垃圾中分離具有高效降解能力的微生物，并制成菌制劑，用于餐廚垃圾高效無害化處理。設(shè)計實驗如下：

步驟一：取一定量的餐廚垃圾樣品，篩除大塊雜質(zhì)后，裝入無菌袋中密封，備用。

步驟二：配制用于培養(yǎng)菌種的培養(yǎng)基，配方如下：

成分	蛋白胨	牛肉膏	氯化鈉	瓊脂
含量（g/L）	10	15	10	5

【1】根據(jù)配方可知，該培養(yǎng)基屬于

A.固體培養(yǎng)基B.液體培養(yǎng)基

C.通用培養(yǎng)基D.選擇培養(yǎng)基

步驟三：制備樣品稀釋液，并將不同濃度的樣品稀釋液涂布于平板培養(yǎng)基表面進行培養(yǎng)，48h后觀察結(jié)果。

【2】在涂布過程中需要用到的工具有

A.無菌圓紙片B.無菌玻璃刮鏟C.酒精燈D.接種環(huán)E.無菌滴管

【3】培養(yǎng)后，培養(yǎng)基上長出了35個菌落，通過觀察菌落的____________，可初步判斷是20種不同的菌種。為進一步確定菌種類型，還需從分子水平進行的檢測方法是_____________。

步驟四：對20種菌種進行分離純化。為了比較這些菌種對餐廚垃圾的降解效果，分別配制含有餐廚垃圾主要成分（淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪和纖維素）的培養(yǎng)基，分別用于測定各菌種對其主要成分的降解效果，并進行測定。圖表示其中4種菌種（X1-X4）在淀粉培養(yǎng)基上的培養(yǎng)結(jié)果，表3為這四種菌的測定結(jié)果。

四種菌種對餐廚垃圾各成分的降解系數(shù)

菌種 編號	淀粉 （D/D0）	蛋白質(zhì) （D/D0）	脂肪 （D/D0）	纖維素 （D/D0）
X1	2.26±0.20	2.26±0.08	1.06±0.05	1.17±0.05
X2	1.90±0.08	1.90±0.08	1.10±0.09	1.05±0.11
X3	1.78±0.05	1.78±0.19	1.20±0.11	3.13±0.26
X4	2.09±0.07	2.09±0.08	2.10±0.02	2.39±0.14

備注：降解系數(shù)（D/D0）越大，降解效果越明顯。

【4】寫出圖所示的測定菌種對淀粉降解效果的實驗原理：_______________。

【5】根據(jù)表中數(shù)據(jù)判斷，降解餐廚垃圾能力最強的菌種是______________。

Answer 1

【答案】

【1】AC

【2】BCE

【3】 形態(tài) 基因檢測

【4】菌種對淀粉降解的能力越強，分解培養(yǎng)基中的淀粉就越多，培養(yǎng)基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大

【5】X4

【解析】

據(jù)表表一中，該培養(yǎng)基的配方中有瓊脂，所以該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的碳源、氮源、無機鹽成分齊全，故為通用培養(yǎng)基的配方。圖中和表二中，X4菌落的D/D0最大，降解餐廚垃圾效果最好。

【1】據(jù)表一分析可知，該培養(yǎng)基的配方中有瓊脂，所以該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的碳源、氮源、無機鹽成分齊全，故為通用培養(yǎng)基的配方，故選AC。

【2】在稀釋涂布平板法接種過程中，需要使用在酒精燈火焰附近操作，用無菌玻璃刮鏟涂布接種，用無菌滴管移取菌液，故選BCE。

【3】培養(yǎng)后，培養(yǎng)基上長出菌落，需要觀察菌落的形態(tài)特征初步判斷菌種的的種類。要進一步確定菌種類型，還需從分子水平進行基因檢測。

【4】根據(jù)題意和題圖分析可知，菌種對淀粉降解的能力越強，分解培養(yǎng)基中的淀粉就越多，培養(yǎng)基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大。

【5】根據(jù)表二綜合分析可知，餐廚垃圾以脂肪和纖維素類為主，所以四種菌種對四種餐廚垃圾的D/D0比值相對較大的是X4。

本題結(jié)合圖表主要課程微生物的培養(yǎng)與分離，意在強化學(xué)生對微生物培養(yǎng)與分離的相關(guān)原理及應(yīng)用的相關(guān)知識的理解與掌握。