某科學(xué)院負(fù)責(zé)一項(xiàng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的試驗(yàn)研究,先后進(jìn)行了系列工作:
(1)將人的生長素基因?qū)肽撤N細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),所用的載體是質(zhì)粒,其過程見圖:
1)結(jié)構(gòu)C稱為__________。在形成過程中除了需要限制性內(nèi)切酶之外,還需要______________酶。
2)結(jié)構(gòu)C導(dǎo)入的成功率較低,因此要篩選導(dǎo)入成功的工程菌。從本實(shí)驗(yàn)出發(fā),檢出成功導(dǎo)入工程菌的方法是_______________。A導(dǎo)入后要成功 表達(dá)要經(jīng)歷__________和__________兩個(gè)過程。
(2)凝膠電泳是一種用作DNA分子量測定的實(shí)驗(yàn)技術(shù)(見下圖)。若取三種DNA(腺狀病毒DNA、質(zhì)粒DNA和量標(biāo)DNA)樣本,用一種限制性內(nèi)切酶切割各樣本等量的DNA,隨后進(jìn)行凝膠電泳(能根據(jù)DNA片段的長度或電荷數(shù)做出不同程度的離散),再用染色劑進(jìn)行染色,使離散的DNA片段能在紫外光下觀察。其中DNA量標(biāo)作為參照物,以便了解分子量,分子量以堿基對(duì)數(shù)(單位bp)表示。
(假設(shè)同一條帶內(nèi)DNA片段的分子大小及堿基序列相同,對(duì)電泳結(jié)果的粗細(xì)可以不作考慮)所得電泳照片如下:
1) 質(zhì)粒DNA被限制性內(nèi)切酶切割的位點(diǎn)有________個(gè);質(zhì)粒DNA的分子量為 _____________bp。
2) 用等量的人DNA為樣本,用同樣的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行切割后電泳,結(jié)果發(fā)現(xiàn)從電泳起點(diǎn)開始至1000bp處全是連續(xù)的條帶,人的DNA分子出現(xiàn)這種電泳分布現(xiàn)象的原因是: __________________。
3) 用另一種限制性內(nèi)切酶對(duì)病毒DNA重新作 切 割、電泳,發(fā)現(xiàn)在8000bP和2000bP處有條帶。若與上題的限制性內(nèi)切酶同時(shí)切割、電泳,則在4500、
3500、1500、500bp處有DNA片段的條帶。下列表示兩種酶的切點(diǎn)位置正確的是( )
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